胱硫醚γ裂解酶/硫化氢通路在同型半胱氨酸诱导的巨噬细胞炎症中的作用及机制研究

发布时间：2021-03-21 11:47

　　第一部分胱硫醚γ裂解酶/硫化氢通路在同型半胱氨酸诱导的巨噬细胞炎症中的作用目的:观察高同型半胱氨酸血症（hyperhomocysteinemia,HHcy）小鼠模型中炎症因子、硫化氢（Hydrogen sulfide,H2S）、胱硫醚γ裂解酶（Cystathionineγ-lyase,CSE）的表达水平,及CSE/H2S通路对同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）诱导的巨噬细胞炎症的影响。方法:在体实验以C57BL/6小鼠为研究对象,用2%（w/v）蛋氨酸饮水建立高同型半胱氨酸血症模型。C57BL/6小鼠随机分为对照组、蛋氨酸组、蛋氨酸+GYY4137（H2S缓释剂）组、蛋氨酸+PAG（CSE抑制剂）组。造模两周后处死动物,使用同型半胱氨酸测定试剂盒检测血浆中Hcy浓度;亚甲蓝法检测血浆中H2S水平;ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）及白细胞介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）表达;Quantitative PCR、western blot法分别检测小鼠原代腹腔巨噬细胞CSE m RNA及蛋白... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：96 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

蛋氨酸对小鼠血浆Hcy、H2S、TNF-α、IL-1β水平及原代腹腔巨噬细胞中CSEmRNA与蛋白表达的影响;

氨酸对小鼠血浆 Hcy、H2S、TNF-α、IL-1β 水平及原代腹腔巨噬细胞mRNA 与蛋白表达的影响鼠血浆中 Hcy (A)、H2S (B)、TNF-α (C)、IL-1β (D)水平及原代腹腔 mRNA (E)、蛋白(F)的表达。18S mRNA 及 GAPDH 蛋白作为内参。.01, ***P<0.001 vs control groups，所有数据均以 mean ±SEM 表示， H2S 对蛋氨酸处理的小鼠及 Hcy 处理的 Raw264.7 巨噬细胞中促炎细上述结果的基础上，为进一步研究H2S的下调是否与轻度高同型半胱促炎细胞因子上调有关，我们分别给蛋氨酸饮食的小鼠注射H2

Y4137和CSE抑制剂PAG。图2-A,B显示，GYY4137 (50 mg/kg/day, 皮下注低蛋氨酸处理的小鼠血浆中促炎细胞因子TNF-α与IL-1β的水平，而PAGkg/day, 皮下注射)则增加蛋氨酸处理的小鼠血浆中促炎细胞因子TNF-α与平。皮下注射GYY4137与PAG对蛋氨酸处理小鼠的血浆Hcy水平没有影响）。接着我们在小鼠巨噬细胞Raw264.7上进行结果的验证。如图2D-H，我们发Hcy可减少Raw264.7细胞中H2S的生成，促进TNF-α与IL-1β的生成。H2S缓4137与Hcy共处理，可呈剂量依赖性地改善Hcy诱导的TNF-α与IL-1β的生成酸为H2S合成所需的底物，当给予半胱氨酸（1 mM）预处理，Raw264.7 细激产生的TNF-α和IL-1β 明显减少，而该作用能被PAG（1 mM）逆转。在氨酸预处理情况下，PAG对Hcy诱导的促炎细胞因子TNF-α与IL-1β的生成没响。这些结果提示在小鼠血浆及巨噬细胞中CSE-H2S合成的下调可能参与的促炎细胞因子的生成。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Hydrogen sulfide ameliorates vascular calcification induced by vitamin D3 plus nicotine in rats[J]. Sheng-ying WU~(2,6) Chun-shui PAN~3 Bin GENG~3 Jing ZHAO~3 Fang YU~3 Yong-zheng PANG~3 Chao-shu TANG~4 Yong-fen QI~(3,4,5) ~2Institute of Cardiovascular Disease,Peking University First Hospital.Beijing 100034 ~3Department of Physiology and Pathophysiology,Peking University Health Science Center,Beijing 100083,China,~4Key Laboratory of Molecular Cardiovascular Science,Ministry of Education,Beijing 100083,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2006(03)



本文编号：3092810