叶酸缺乏对脑缺血再灌注大鼠神经炎症的作用及机制研究
发布时间：2021-03-23 07:42
目的通过线拴法制备SD雄性大鼠中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）的脑缺血再灌注模型,体外培养缺氧缺糖及复氧（oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）BV-2细胞/原代星形胶质细胞模型,观察叶酸缺乏（folic acid deficiency,FD）对大鼠脑缺血再灌注模型和体外氧糖剥夺/复氧细胞模型中小胶质细胞/星形胶质细胞活化及其炎症因子表达的影响,通过相关抑制剂及叶酸缺乏共同干预探讨脑缺血再灌注后小胶质细胞及星形胶质细胞活化的机制,为防治与叶酸缺乏相关的脑缺血性疾病提供新的治疗方法及实验依据。方法第一部分:30只体重在120-150 g的雄性SD大鼠随机分为假手术组（SHAM）、大脑中动脉缺血再灌注组（MCAO）、叶酸缺乏+大脑中动脉缺血再灌注组（MCAO+FD）,每组10只。正常饲料/叶酸缺乏饲料喂养28天后进行MCAO手术;造模后脑组织制成石蜡切片,苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin,HE,n=4）和Fluoro-jade B法（FJ-B,n=4）检...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HE染色检测叶酸缺乏对大脑梗死后海马区神经细胞病理改变影响
染色检测叶酸缺乏对大脑梗死后海马区神经细胞变性的影响。A：左、G 区、CA1 区和 CA3 区 FJ-B 单标记及其放大图（FJ-B 为绿色，DAPG 区、CA1 区和 CA3 区 FJ-B 阳性细胞数/DAPI 细胞数均值及标准差柱较，b：与 MCAO 组比较，*表示 MCAO+FD 组 DG 区、CA1 区和 C.05（n=4，scale bar=50 μm）缺乏对 I/R 大鼠患侧海马小胶质细胞激活的影响织切片经免疫荧光单标记法检测结果如图 3 所示。SHAM 组在 CA3 区的 Iba-1 阳性细胞数目很少，甚至一些视野中未见阳M 组的大鼠大脑海马区活化的小胶质细胞很少；MCAO 手术胶质细胞明显被激活，叶酸缺乏后小胶质细胞进一步被激活，与差异有统计学意义（P<0.05）。对于 MCAO+FD 组的三个亚区得出 CA1 区相对于 DG 区和 CA3 区阳性细胞率显著升高，差P<0.05），而 DG 区和 CA3 区差异尚不能认为有统计学差异（大鼠海马组织蛋白的 Western blot 检测进一步证实，与 SHAM
激活 MCAO 后大鼠海马区的小胶质细胞。A：左、中、右分别 区 Iba-1 免疫荧光单标记及其放大图（Iba-1 为红色，DAPI 1 区和 CA3 区 Iba-1 免疫荧光阳性细胞数/DAPI 细胞数均值及ot 检测叶酸缺乏后脑组织中 Iba-1 的表达结果，a：与 SHAM，*表示 MCAO+FD 组 DG 区、CA1 区和 CA3 区两两比较，）乏对 I/R 大鼠患侧海马区小胶质细胞中 TNF-α表达的见，SHAM 组在 DG 区、CA1 区和 CA3 区几乎未见 I，表明 SHAM 组的大鼠大脑海马区小胶质细胞几乎未标阳性细胞数目相对较多。同时可以明显看出 MCAO更多阳性细胞的表达。分别对 SHAM 组、MCAO 组A1 区和 CA3 区 Iba-1/TNF-α阳性细胞数/DAPI 细胞数发现，MCAO 组三个亚区相对于 SHAM 组该比值增大CAO 组该比值增大，差异有统计学意义（P<0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]小胶质细胞自噬在缺血性脑卒中中作用的研究进展[J]. 王栋,侯博儒,杨文桢,康军林,任海军. 中国康复理论与实践. 2016(12)
[2]叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸代谢与脑梗死患者脂质水平、炎症反应程度的相关性[J]. 丁莉. 海南医学院学报. 2017(05)
[3]高血压人群血清叶酸与炎症因子的相关性研究[J]. 郑辐,薛瑶纯,李培德,韦柳,赵秀娟,马静. 中国热带医学. 2015(05)
[4]重度痴呆患者和血清维生素B12、叶酸及同型半胱氨酸水平及其相关性研究[J]. 丁仁峰,叶绿素,杨华,郭忠伟. 临床精神医学杂志. 2015(01)
[5]小胶质细胞在缺血性脑卒中的神经保护作用[J]. 李立,吴世政,张淑坤. 实用医学杂志. 2014(23)
[6]Enteric glial cells and their role in the intestinal epithelial barrier[J]. Yan-Bo Yu,Yan-Qing. World Journal of Gastroenterology. 2014(32)
[7]小胶质细胞及免疫相关受体在老年痴呆症中的作用研究进展[J]. 何晓,孙秉贵. 药学学报. 2014(06)
[8]叶酸干预对运动人群血浆炎症因子的影响[J]. 曾榛,张援,王力先,陈严,石珊,马静. 华南预防医学. 2014(02)
[9]叶酸和维生素B12对伴有高同型半胱氨酸血症脑梗死患者炎症因子的干预研究[J]. 苏牟潇,姚力瑛. 中国医药导报. 2013(26)
[10]健脑安对血管性痴呆大鼠海马区IL-1β诱导的c-fos蛋白表达的影响[J]. 时晶,田金洲,朱爱华,尹军祥,高扬,林嘉友,王永炎. 中国中药杂志. 2004(06)
博士论文
[1]调节性T细胞移植对实验动物脑缺血损伤的保护作用[D]. 李佩盈.复旦大学 2013
硕士论文
[1]Aβ在小胶质细胞中的内吞、转运和降解的研究[D]. 李佳.厦门大学 2014
本文编号：3095433
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HE染色检测叶酸缺乏对大脑梗死后海马区神经细胞病理改变影响
染色检测叶酸缺乏对大脑梗死后海马区神经细胞变性的影响。A：左、G 区、CA1 区和 CA3 区 FJ-B 单标记及其放大图（FJ-B 为绿色，DAPG 区、CA1 区和 CA3 区 FJ-B 阳性细胞数/DAPI 细胞数均值及标准差柱较，b：与 MCAO 组比较，*表示 MCAO+FD 组 DG 区、CA1 区和 C.05（n=4，scale bar=50 μm）缺乏对 I/R 大鼠患侧海马小胶质细胞激活的影响织切片经免疫荧光单标记法检测结果如图 3 所示。SHAM 组在 CA3 区的 Iba-1 阳性细胞数目很少，甚至一些视野中未见阳M 组的大鼠大脑海马区活化的小胶质细胞很少；MCAO 手术胶质细胞明显被激活，叶酸缺乏后小胶质细胞进一步被激活，与差异有统计学意义（P<0.05）。对于 MCAO+FD 组的三个亚区得出 CA1 区相对于 DG 区和 CA3 区阳性细胞率显著升高，差P<0.05），而 DG 区和 CA3 区差异尚不能认为有统计学差异（大鼠海马组织蛋白的 Western blot 检测进一步证实，与 SHAM
激活 MCAO 后大鼠海马区的小胶质细胞。A：左、中、右分别 区 Iba-1 免疫荧光单标记及其放大图（Iba-1 为红色，DAPI 1 区和 CA3 区 Iba-1 免疫荧光阳性细胞数/DAPI 细胞数均值及ot 检测叶酸缺乏后脑组织中 Iba-1 的表达结果，a：与 SHAM，*表示 MCAO+FD 组 DG 区、CA1 区和 CA3 区两两比较，）乏对 I/R 大鼠患侧海马区小胶质细胞中 TNF-α表达的见，SHAM 组在 DG 区、CA1 区和 CA3 区几乎未见 I，表明 SHAM 组的大鼠大脑海马区小胶质细胞几乎未标阳性细胞数目相对较多。同时可以明显看出 MCAO更多阳性细胞的表达。分别对 SHAM 组、MCAO 组A1 区和 CA3 区 Iba-1/TNF-α阳性细胞数/DAPI 细胞数发现，MCAO 组三个亚区相对于 SHAM 组该比值增大CAO 组该比值增大，差异有统计学意义（P<0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]小胶质细胞自噬在缺血性脑卒中中作用的研究进展[J]. 王栋,侯博儒,杨文桢,康军林,任海军. 中国康复理论与实践. 2016(12)
[2]叶酸、维生素B12、同型半胱氨酸代谢与脑梗死患者脂质水平、炎症反应程度的相关性[J]. 丁莉. 海南医学院学报. 2017(05)
[3]高血压人群血清叶酸与炎症因子的相关性研究[J]. 郑辐,薛瑶纯,李培德,韦柳,赵秀娟,马静. 中国热带医学. 2015(05)
[4]重度痴呆患者和血清维生素B12、叶酸及同型半胱氨酸水平及其相关性研究[J]. 丁仁峰,叶绿素,杨华,郭忠伟. 临床精神医学杂志. 2015(01)
[5]小胶质细胞在缺血性脑卒中的神经保护作用[J]. 李立,吴世政,张淑坤. 实用医学杂志. 2014(23)
[6]Enteric glial cells and their role in the intestinal epithelial barrier[J]. Yan-Bo Yu,Yan-Qing. World Journal of Gastroenterology. 2014(32)
[7]小胶质细胞及免疫相关受体在老年痴呆症中的作用研究进展[J]. 何晓,孙秉贵. 药学学报. 2014(06)
[8]叶酸干预对运动人群血浆炎症因子的影响[J]. 曾榛,张援,王力先,陈严,石珊,马静. 华南预防医学. 2014(02)
[9]叶酸和维生素B12对伴有高同型半胱氨酸血症脑梗死患者炎症因子的干预研究[J]. 苏牟潇,姚力瑛. 中国医药导报. 2013(26)
[10]健脑安对血管性痴呆大鼠海马区IL-1β诱导的c-fos蛋白表达的影响[J]. 时晶,田金洲,朱爱华,尹军祥,高扬,林嘉友,王永炎. 中国中药杂志. 2004(06)
博士论文
[1]调节性T细胞移植对实验动物脑缺血损伤的保护作用[D]. 李佩盈.复旦大学 2013
硕士论文
[1]Aβ在小胶质细胞中的内吞、转运和降解的研究[D]. 李佳.厦门大学 2014
本文编号：3095433
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