miR-33a-5p靶向SMAD7对血管平滑肌细胞增殖、凋亡、迁移及细胞外基质降解的影响

发布时间：2021-04-02 06:34

　　目的:探究miR-33a-5p靶向SMAD7对血管平滑肌细胞增殖、凋亡、迁移及细胞外基质降解的影响。方法:生物信息学预测靶向关系,荧光素实验进一步验证靶向关系,RT-PCR检测miR-33a-5p和SMAD7的表达,CCK-8法检测VSMC的增殖,流式检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测Ki67、PCNA、Caspase-3、 Caspase-9、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。结果:PDGF-bb处理能够增强血管平滑肌细胞增殖,抑制miR-33的表达;miR-33a-5p与SMAD7在3′UTR区存在结合位点,miR-33a-5p直接靶向作用于SMAD7,且miR-33a-5p过表达抑制SMAD7的表达;miR-33a-5p靶向SMAD7抑制PDGF-bb诱导的血管平滑肌细胞增殖、下调增殖标记蛋白PCNA和Ki67表达,促进细胞凋亡、上调凋亡标记蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达,降低伤口愈合率、抑制细胞迁移,下调MMP-2和MMP-9的表达（P<0.01）。结论:miR-33a-5p靶向SMAD7抑制PDGF-bb诱导的血管平滑肌... 

【文章来源】：中国免疫学杂志. 2020,36(13)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

Western blot检测MMP-2和MMP-9的表达水平

通过Western blot检测SMD7蛋白表达水平发现:与对照组相比,miR-33a-5p mimic组VSMCs细胞SMAD7蛋白表达明显下调,差异具有统计学意义(P<0.01,图3B),SMAD7组VSMCs细胞SMAD7蛋白表达明显上调,差异具有统计学意义(P<0.01,图3B);mimic+SMAD7 组VSMCs细胞SMAD7表达比miR-33a-5p mimic组明显上调、比SMAD7组明显下调,差异具有统计学意义(P<0.01,图3B)。2.4 miR-33a-5p靶向SMAD7抑制VSMCs细胞增殖

与对照组相比,miR-33a-5p mimic组VSMCs细胞增殖明显减弱,差异具有统计学意义(P<0.01,图4A),SMAD7组VSMCs细胞增殖明显增强,差异具有统计学意义(P<0.01,图4A);mimic+SMAD7 组VSMCs细胞增殖比miR-33a-5p mimic组明显增强、比SMAD7组明显减弱,差异具有统计学意义(P<0.01,图4A)。图3 miR-33a-5p和SMD7表达水平

【参考文献】：
期刊论文
[1]Smad7基因过表达的促增殖作用机制探讨[J]. 霍艳英,张开泰,李邦印,徐勤枝,段瑞峰,胡迎春,项晓琼,李刚,吴德昌.  中华肿瘤杂志. 2004(09)



本文编号：3114780