AngⅡ诱导STAT3信号通路依赖的自噬促VSMCs增殖作用及机制研究
发布时间：2021-04-06 23:10
背景和目的血管平滑肌细胞（VSMCs）异常增殖是高血压、动脉粥样硬化等血管重构性疾病发生发展的病理生理学基础。研究清楚诱导VSMCs异常增殖的因素和机制,对防治该类疾病有着重要的理论意义和科学价值。自噬是真核生物在应激状态下维持细胞内稳态的一种自我保护机制。自噬参与了多种细胞因子、血管活性物质、剪切应力、nc RNA等诱导的VSMCs增殖,一些调节哺乳动物细胞自噬的信号通路（如PI3K/AKT/m TOR）同时也是调节细胞增殖的重要信号通路。血管紧张素Ⅱ作为诱导VSMCs SS异常增殖的主要生物活性因子之一,通过氧化应激和JAK2-STAT3、p38MAPK、PI3K/AKt等多条信号转导通路促进VSMCs增殖。最新研究发现,AngⅡ可通过氧化应激和Rho A/Rho Kinase（ROCK）信号途径诱导VSMCs自噬。mi R-17-5p通过负向靶向调节STAT3,诱导低氧条件下的自噬发挥抗VSMCs SS凋亡作用。因此,本课题拟以人主动脉平滑肌细胞为研究对象,应用分子生物学方法探讨AngⅡ诱导STAT3信号通路对自噬的调节以及自噬对VSMCs增殖的影响,为阐明血管重构性疾病的病理生...
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
研究假说图
图 4.1 AngⅡ处理浓度和时间对 LC3B -Ⅱ、Beclin1 和 p62 蛋白表达的影响不同浓度 AngⅡ处理 VSMCs 24 小时和 10-7mol/LAngⅡ处理 VSMCs 不同时间，Western blot法检测 Beclin1（A）、LC3B-Ⅱ（B）、p62 的表达量（C）。*P<0.05 vs 0 mol/L；**P <0.01vs 0mol/L；**P <0.01 vs 0 mol/L；***P <0.001vs 0 mol/L；# #P <0.01vs 10-7mol/L，n=3。4.2 AngⅡ促进 VSMCsS 自噬流的产生取对数生长期 VSMCs，用 50μM chloroquine 预处理 30min，再用 10-7mol/LAngⅡ孵育 24h 后，Western blot 法检测 LC3B-II 表达水平。结果显示，chloroquine的预处理使 VSMCs 基础的 LC3B-II 水平升高，具有统计学意义（P＜ 0.05）（图11
图 4.2 氯喹预处理对 LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ转化率的影响用 50μM chloroquine 预处理 30min，再用 10-7mol/LAngⅡ孵育 VSMCs 24h，Western blot 法检测 LC3-Ⅱ表达量。**P <0.01 vs control group；#P <0.05 vs AngⅡ group，n=3。4.3AngⅡ诱导的自噬促进 VSMCs 增殖4.3.1AngⅡ促进 VSMCs 增殖取对数生长期 VSMCs，用不同浓度 AngⅡ（10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L）孵育 VSMCs 24 小时以及用 10-7mol/LAngⅡ孵育 VSMCs不同时间（0h、6h、12h、24h、36h），Western blot 法检测增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平。结果显示，在 10-10～10-7mol/L 的浓度范围内，PCNA 表达量呈 AngⅡ浓度依赖性地上调，从 10-10mol/L 浓度开始上升明显，具有统计学意义（P＜ 0.05）（图 4.3 A）。与 10-7mol/L 相比，10-6mol/LAngⅡ使 PCNA 表达减少；在 0-24h的时间范围内 PCNA 表达量呈时间依赖性地增加，从 6h 开始上升显著，具有统
【参考文献】：
期刊论文
[1]电针“百会”“太冲”对自发性高血压大鼠心肌肥大和自噬的影响[J]. 张跃,纪智,袁静云,王紫娟,梁靖蓉,吴娇娟,臧颖颖,王朝阳,刘清国. 针刺研究. 2019(02)
[2]大黄素通过自噬抑制血管平滑肌细胞的增殖和迁移[J]. 权彦,李小蓉,赵忠孝,刘靖丽,张朋. 西北药学杂志. 2018(01)
[3]糖尿病发病的表观遗传学机制[J]. 洪陈亮,秦旭平. 中南医学科学杂志. 2017(01)
[4]选择性自噬接头蛋白p62/sequestosome 1的研究进展[J]. 陈易斯,宋福永. 中国药理学与毒理学杂志. 2016(03)
[5]STAT3与肿瘤自噬[J]. 周唯,许言午,潘一滨. 生命的化学. 2016(01)
[6]自噬干预对低剪切应力下血管内皮细胞eNOS和ET-1表达的影响[J]. 李小红,郭凤霞,杨沁,李荣庆,赵战芝,危当恒. 中国动脉硬化杂志. 2014(09)
[7]自噬在心血管疾病中的作用研究进展[J]. 林超,刘兆国,钱星,徐斌,包东桥,李育,卞慧敏. 中国药理学通报. 2014(10)
[8]STAT3信号转导通路抑制剂诱导胶质瘤干细胞产生自噬的研究[J]. 赛克,WK Alfred Yung,Howard Colman,Waldemar Priebe,陈忠平. 中国神经肿瘤杂志. 2011(02)
[9]自噬的调控通路和肿瘤[J]. 张秀春,李丹妮,李丰. 生命科学. 2011(01)
[10]血管重构及其药物治疗[J]. 曾泗宇,秦旭平. 现代生物医学进展. 2007(05)
本文编号：3122323
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
研究假说图
图 4.1 AngⅡ处理浓度和时间对 LC3B -Ⅱ、Beclin1 和 p62 蛋白表达的影响不同浓度 AngⅡ处理 VSMCs 24 小时和 10-7mol/LAngⅡ处理 VSMCs 不同时间，Western blot法检测 Beclin1（A）、LC3B-Ⅱ（B）、p62 的表达量（C）。*P<0.05 vs 0 mol/L；**P <0.01vs 0mol/L；**P <0.01 vs 0 mol/L；***P <0.001vs 0 mol/L；# #P <0.01vs 10-7mol/L，n=3。4.2 AngⅡ促进 VSMCsS 自噬流的产生取对数生长期 VSMCs，用 50μM chloroquine 预处理 30min，再用 10-7mol/LAngⅡ孵育 24h 后，Western blot 法检测 LC3B-II 表达水平。结果显示，chloroquine的预处理使 VSMCs 基础的 LC3B-II 水平升高，具有统计学意义（P＜ 0.05）（图11
图 4.2 氯喹预处理对 LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ转化率的影响用 50μM chloroquine 预处理 30min，再用 10-7mol/LAngⅡ孵育 VSMCs 24h，Western blot 法检测 LC3-Ⅱ表达量。**P <0.01 vs control group；#P <0.05 vs AngⅡ group，n=3。4.3AngⅡ诱导的自噬促进 VSMCs 增殖4.3.1AngⅡ促进 VSMCs 增殖取对数生长期 VSMCs，用不同浓度 AngⅡ（10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L）孵育 VSMCs 24 小时以及用 10-7mol/LAngⅡ孵育 VSMCs不同时间（0h、6h、12h、24h、36h），Western blot 法检测增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平。结果显示，在 10-10～10-7mol/L 的浓度范围内，PCNA 表达量呈 AngⅡ浓度依赖性地上调，从 10-10mol/L 浓度开始上升明显，具有统计学意义（P＜ 0.05）（图 4.3 A）。与 10-7mol/L 相比，10-6mol/LAngⅡ使 PCNA 表达减少；在 0-24h的时间范围内 PCNA 表达量呈时间依赖性地增加，从 6h 开始上升显著，具有统
【参考文献】：
期刊论文
[1]电针“百会”“太冲”对自发性高血压大鼠心肌肥大和自噬的影响[J]. 张跃,纪智,袁静云,王紫娟,梁靖蓉,吴娇娟,臧颖颖,王朝阳,刘清国. 针刺研究. 2019(02)
[2]大黄素通过自噬抑制血管平滑肌细胞的增殖和迁移[J]. 权彦,李小蓉,赵忠孝,刘靖丽,张朋. 西北药学杂志. 2018(01)
[3]糖尿病发病的表观遗传学机制[J]. 洪陈亮,秦旭平. 中南医学科学杂志. 2017(01)
[4]选择性自噬接头蛋白p62/sequestosome 1的研究进展[J]. 陈易斯,宋福永. 中国药理学与毒理学杂志. 2016(03)
[5]STAT3与肿瘤自噬[J]. 周唯,许言午,潘一滨. 生命的化学. 2016(01)
[6]自噬干预对低剪切应力下血管内皮细胞eNOS和ET-1表达的影响[J]. 李小红,郭凤霞,杨沁,李荣庆,赵战芝,危当恒. 中国动脉硬化杂志. 2014(09)
[7]自噬在心血管疾病中的作用研究进展[J]. 林超,刘兆国,钱星,徐斌,包东桥,李育,卞慧敏. 中国药理学通报. 2014(10)
[8]STAT3信号转导通路抑制剂诱导胶质瘤干细胞产生自噬的研究[J]. 赛克,WK Alfred Yung,Howard Colman,Waldemar Priebe,陈忠平. 中国神经肿瘤杂志. 2011(02)
[9]自噬的调控通路和肿瘤[J]. 张秀春,李丹妮,李丰. 生命科学. 2011(01)
[10]血管重构及其药物治疗[J]. 曾泗宇,秦旭平. 现代生物医学进展. 2007(05)
本文编号：3122323
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