TRPA1在THP-1来源巨噬细胞上表达及调控LPC诱导的炎症反应
发布时间：2021-04-13 15:06
瞬时受体电位锚蛋白离子通道1（Transient receptor potential ankyrin 1,TRPA1）是瞬时受体电位（Transient receptor potential,TRP）超家族的成员之一。TRPA1不仅是主要的痛觉及冷觉感受器,同时也能感受细胞外刺激物刺激,机械刺激等。在痛觉,温度感知,炎症反应等生理功能中发挥了重要作用。尽管TRPA1广泛表达于各组织和器官中,但在淋巴细胞中的表达及功能研究还鲜有报道。溶血磷脂酰胆碱（Lysophosphatidylcholine,LPC）是哺乳动物体内重要的脂质分子,其是构成细胞膜及氧化脂蛋白的主要组成部分。当动脉粥样硬化发生时,机体内的磷脂酶A2（Phospholipase A2,PLA2）能催化细胞膜上的磷脂酰胆碱（Phosphatidylcholine,PC）及氧化脂蛋白产生LPC。LPC是重要的促炎以及促动脉粥样硬化脂质,能促进单核细胞的粘附,以及巨噬细胞向泡沫细胞转化。在内皮细胞中,LPC能促进线粒体活性氧（Mitochondrial reactive oxygen species,mtROS）的产生。在单核...
【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１哺乳类动物ＴＲＰ通道超家族系统发生树
１１以及１２可以剪切ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ的连接处，使Ｎ端及Ｃ端分离。Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ??的Ｎ端具有引发细胞焦亡的活性，并对细菌有很强的毒性，而Ｃ端与Ｎ端的结??合能抑制其作用（Ｓｈｉ?ｅＺ?〇／．，２０１７）ｃ＝Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ参与细胞焦亡过程如图１－５所示。??Ｉ?Ｔｏ？ｉｎｓ?１?Ｊ?＇?Ａｃｔｉｖｅ?ｃａＳｐａ？－４／５／ｎ?ｐ?Ｉ?，?Ｊ?＼?＼?ＰＶ？ｐｔ〇ｓｉｓ??！?Ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ?ｓｅｎｓｏｒｓ?＾＾?１??ｌ?｛ＮＬＲＰｌ，?ＮＬＲＰ３，?Ｉ?Ｉ?ＶｊＳｒ??ｌ?ＭＡＩＰｓ，ＡＩＭ２，?Ｐｙｒｉｎ，．．．）?．?Ｋ?★?／??Ｉ?ＮＬＲＣ４?／??Ｐｒｏｃａｓｐａｓｅ－１?ＭＢＩ?＾＾ＳＤＭＤ?ｐｏｒｅ＿＿??Ａｃｔｉｖｅ?ｃａｓｐａｓｅ－ｌ?Ｐｒｏ－ＩＬ－ｌ｜３／??＾——麵??图１－５?Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ参与细胞焦亡示意图。（Ｓｈｉ?ｅｔ?ａＡ，?２０１７）??图注：Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ在未剪切时成失活状态，当炎症小体感知细胞中相关信号后，通过??作用ｃａｓｐａｓｅ－１剪切ＩＬ－１?０前体为活化态并剪切ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ，使其Ｎ端和Ｃ端??１６??
为了验证ＴＲＰＡ１在ＴＨＰ－１来源的巨噬细胞上有ＲＮＡ水平转录以及蛋白质??水平的表达。我们分别运用了?ＲＴ－ｑＰＣＲ鉴定了吵ｄ的ｍＲＮＡ转录（如图３－１Ａ）??以及用ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ鉴定了其蛋白质表达水平（如图３－１Ｂ）。通过免疫焚光检??测，分析ＴＲＰＡ１在细胞上的分布。从共聚焦显微图片上能够发现ＴＲＰＡ１在细胞??膜以及细胞胞质中均有表达（如图３－１Ｃ）。最后，为了验证ＴＲＰＡ１在细胞中具??有生理功能，并能介导钙离子内流，我们用钙离子成像进行了分析。钙成像结果??显示ＴＲＰＡ１的激动剂异硫氰酸丙酯（ＡＩＴＣ）能引起ＴＨＰ－１来源的巨噬细胞产生??Ａ?，?？?沪?Ｂ??（ｂｐ）?ＴＲＰＡ１?ＨＵＭＰ?１１０?ｋＤａ??２５０－?Ｉ??ｉｎｎ????１?ｓ５ｋＤａ??ｃ?ＴＲＰＡ１?ＤＡＰＩ?Ｍｅｒｇｅ??■■■??ＰＭＰＢＰＭＨ??Ｄ?１．６－??１．４－?—?ＡＩＴＣ??咖ｍｒｉｒｒ－「．?—?ＡＩＴＣ＋ＨＣ０３００３１??ｇ?１．２－???????｜?＾???５；?１．０－?！丄一＿＿，．－丨?ＶＴＥ—一??０．８－?＝??〇６〇?５０?１００
本文编号：3135521
【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１哺乳类动物ＴＲＰ通道超家族系统发生树
１１以及１２可以剪切ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ的连接处，使Ｎ端及Ｃ端分离。Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ??的Ｎ端具有引发细胞焦亡的活性，并对细菌有很强的毒性，而Ｃ端与Ｎ端的结??合能抑制其作用（Ｓｈｉ?ｅＺ?〇／．，２０１７）ｃ＝Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ参与细胞焦亡过程如图１－５所示。??Ｉ?Ｔｏ？ｉｎｓ?１?Ｊ?＇?Ａｃｔｉｖｅ?ｃａＳｐａ？－４／５／ｎ?ｐ?Ｉ?，?Ｊ?＼?＼?ＰＶ？ｐｔ〇ｓｉｓ??！?Ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ?ｓｅｎｓｏｒｓ?＾＾?１??ｌ?｛ＮＬＲＰｌ，?ＮＬＲＰ３，?Ｉ?Ｉ?ＶｊＳｒ??ｌ?ＭＡＩＰｓ，ＡＩＭ２，?Ｐｙｒｉｎ，．．．）?．?Ｋ?★?／??Ｉ?ＮＬＲＣ４?／??Ｐｒｏｃａｓｐａｓｅ－１?ＭＢＩ?＾＾ＳＤＭＤ?ｐｏｒｅ＿＿??Ａｃｔｉｖｅ?ｃａｓｐａｓｅ－ｌ?Ｐｒｏ－ＩＬ－ｌ｜３／??＾——麵??图１－５?Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ参与细胞焦亡示意图。（Ｓｈｉ?ｅｔ?ａＡ，?２０１７）??图注：Ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ在未剪切时成失活状态，当炎症小体感知细胞中相关信号后，通过??作用ｃａｓｐａｓｅ－１剪切ＩＬ－１?０前体为活化态并剪切ｇａｓｄｅｒｍｉｎ?Ｄ，使其Ｎ端和Ｃ端??１６??
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