肝脏持续过表达IL-15对NK/NKT细胞和T细胞数目和活化状态的影响
发布时间:2021-06-14 14:59
目的研究靶向肝脏过表达细胞因子IL-15对机体免疫系统的影响。方法构建IL-15重组表达质粒pLIVE-IL-15,采用高压注射的方式尾静脉注射C57BL/6小鼠,ELISA检测小鼠血清中IL-15的表达水平,流式检测小鼠脾脏和肝脏淋巴细胞亚群变化。结果成功构建pLIVE-IL-15质粒,pLIVE-IL-15质粒高压注射小鼠后血清中能检测到IL-15持续表达。与pLIVE-EGFP对照组相比,pLIVE-IL-15质粒注射鼠天然免疫系统NK细胞和NKT细胞以及获得性免疫系统的CD4+T细胞和CD8+T细胞数目均显著增加(P<0.05)。体内过表达IL-15促进NK细胞高表达CD69和IFN-γ,而NKT细胞活化状态改变不明显,IL-15能显著诱导CD8+T细胞高分泌IFN-γ(P<0.05),而对CD4+T细胞IFN-γ分泌影响较小。结论 pLIVE-IL-15靶向肝脏后能在体内持续表达,并且能调节天然免疫系统和获得性免疫系统反应。
【文章来源】:第三军医大学学报. 2013,35(16)北大核心CSCD
【文章页数】:6 页
【部分图文】:
PCR方法检测IL-15基因
黾樱?饪赡苡隢KT细胞本底活化水平较高有关。2.4pLIVE-IL-15质粒持续表达对获得性免疫系统的影响我们发现IL-15质粒高压注射后,小鼠脾脏和肝脏中CD4+T细胞和CD8+T细胞数目均有显著增长(P<0.05,图5A、B)。CD4+T细胞IFN-γ的表达在IL-15刺激后只是略有增加(图5C、D),CD8+T细胞分泌IFN-γ的能力要明显高于pLIVE-EGFP对照组(P<0.05,图5E、F)。700600500400300200100001234血清IL鄄15浓度(pg/mL)pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄15注射后时间(t/周)图2ELISA检测质粒高压注射后小鼠血清中IL-15含量104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄H104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄H104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄H104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄HCD3脾脏NK肝脏NKNK1.1pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄154.7%12.14%9.0%47.66%104103102101100100101102103104NK1.1IFN鄄γ104103102101100100101102103104104103102101100100101102103104IFN鄄γ104103102101100100101102103104IFN鄄γ脾脏NK肝脏NKCD3-NK1.1+pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄158.17%9.75%4.93%NK1.1IFN鄄γNK1.1IFN鄄γNK
K肝脏NKCD69pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄1530.23%0FL1鄄H60015100101102103104FL1鄄H细胞数目044.28%100101102103104FL1鄄H22906050403020100NK细胞数目(105)脾脏肝脏pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄15aaACBD细胞数目细胞数目细胞数目11.02%58.98%6.79%A:NK1.1+CD3-NK细胞比例;B:NK细胞数对比分析a:P<0.05,与pLIVE-EGFP质粒比较;C:CD69表达;D:NK细胞IFN-γ表达图3流式细胞仪检测IL-15对小鼠脾脏和肝脏NK细胞数目和活化状态的影响1694第35卷第16期2013年8月30日第三军医大学学报JThirdMilMedUnivVol.35,No.16Aug.302013
本文编号:3230074
【文章来源】:第三军医大学学报. 2013,35(16)北大核心CSCD
【文章页数】:6 页
【部分图文】:
PCR方法检测IL-15基因
黾樱?饪赡苡隢KT细胞本底活化水平较高有关。2.4pLIVE-IL-15质粒持续表达对获得性免疫系统的影响我们发现IL-15质粒高压注射后,小鼠脾脏和肝脏中CD4+T细胞和CD8+T细胞数目均有显著增长(P<0.05,图5A、B)。CD4+T细胞IFN-γ的表达在IL-15刺激后只是略有增加(图5C、D),CD8+T细胞分泌IFN-γ的能力要明显高于pLIVE-EGFP对照组(P<0.05,图5E、F)。700600500400300200100001234血清IL鄄15浓度(pg/mL)pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄15注射后时间(t/周)图2ELISA检测质粒高压注射后小鼠血清中IL-15含量104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄H104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄H104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄H104103102101100100101102103104FL2鄄HFL3鄄HCD3脾脏NK肝脏NKNK1.1pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄154.7%12.14%9.0%47.66%104103102101100100101102103104NK1.1IFN鄄γ104103102101100100101102103104104103102101100100101102103104IFN鄄γ104103102101100100101102103104IFN鄄γ脾脏NK肝脏NKCD3-NK1.1+pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄158.17%9.75%4.93%NK1.1IFN鄄γNK1.1IFN鄄γNK
K肝脏NKCD69pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄1530.23%0FL1鄄H60015100101102103104FL1鄄H细胞数目044.28%100101102103104FL1鄄H22906050403020100NK细胞数目(105)脾脏肝脏pLIVE鄄EGFPpLIVE鄄IL鄄15aaACBD细胞数目细胞数目细胞数目11.02%58.98%6.79%A:NK1.1+CD3-NK细胞比例;B:NK细胞数对比分析a:P<0.05,与pLIVE-EGFP质粒比较;C:CD69表达;D:NK细胞IFN-γ表达图3流式细胞仪检测IL-15对小鼠脾脏和肝脏NK细胞数目和活化状态的影响1694第35卷第16期2013年8月30日第三军医大学学报JThirdMilMedUnivVol.35,No.16Aug.302013
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