霍乱毒素样抗肿瘤嵌合蛋白佐剂的设计、制备及活性评价

发布时间：2021-06-16 15:10

　　抗癌疫苗因其能够激活自身免疫系统靶向攻击表达有肿瘤特异性抗原的癌细胞而被广泛关注。含有肿瘤抗原表位肽的亚单位疫苗因其独特的优势而成为抗癌疫苗的研发热点。然而,抗原表位肽免疫原性弱,体内易被降解,常常介导机体耐受,难以达到治疗肿瘤的目的。有效发挥疫苗抗肿瘤效应的关键在于打破免疫耐受,激活体内细胞免疫应答。前列腺癌的微环境中存在多种特异性肿瘤相关抗原（TAAs）,是研究抗癌疫苗的理想目标。使用前列腺癌TAAs作为抗原表位来源设计亚单位疫苗,需要佐剂帮助表位肽激活抗原提呈细胞（APC）,并经交叉提呈途径激活细胞免疫。由于目前常用的佐剂-肽混合物不能确保将二者共定位于同一个APC,因而疫苗的抗肿瘤活性不高。因此,基于完整的霍乱毒素（CT）六聚体的结构,将鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（mGM-CSF）通过基因工程方法融合表达到CTA2（霍乱毒素的A2亚基）的N端,并在霍乱毒素B亚基（CTB）的C端融合人源前列腺特异性膜抗原（PSMA）表位肽片段PSMA624-632,设计了CT样嵌合蛋白,并对其抗前列腺癌活性及机制进行了研究。研究方法:1.CT样嵌合蛋白mGM-CSF-CTA2/（CTB-PS... 

【文章来源】：广东工业大学广东省

【文章页数】：105 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

佐剂的作用方式

-2 霍乱毒素（CT）晶体结构。(A) CT（侧视图;蛋白质数据库[PDB] ID：1XTC）。CTA以红色显示（CTA1 为深红色，CTA2 为浅红色），CTB 亚基以蓝色显示;（B）CTB（俯图; PDB ID：去除了 CTA 亚基的 1XTC）。B 亚基的每个单体显示为不同的颜色。ure 1-2. Cholera toxin (CT) crystal structure. (A) CT (side view; Protein Data Bank [PDB] IDTC). The CTAsubunit is shown in red (CTA1 in dark red and CTA2 in light red) and the CTBunit is shown in blue; (B) CTB (top view; PDB ID: 1XTC with CTAsubunit removed). Eachmonomer of the B subunit is show in a different color.此外，五聚体的 CTB 还可以以高亲和力结合到细胞表面的 GM1 受体，使其更好地与免疫系统作用。GM1 受体存在于所有有核哺乳动物细胞膜上，包道上皮细胞，巨噬细胞，树突状细胞和 B 细胞[51-52]。图 1-3 所示的是 GM1于肠道上皮细胞的表面，当在口服疫苗制剂中使用 CTB 时，CTB 可以被 上的受体识别，结合在细胞膜上。

乱毒素（CT）晶体结构。(A) CT（侧视图;蛋白质数据库[PDB] ID：1X色显示（CTA1 为深红色，CTA2 为浅红色），CTB 亚基以蓝色显示;（BDB ID：去除了 CTA 亚基的 1XTC）。B 亚基的每个单体显示为不同. Cholera toxin (CT) crystal structure. (A) CT (side view; Protein Data Banhe CTAsubunit is shown in red (CTA1 in dark red and CTA2 in light red) as shown in blue; (B) CTB (top view; PDB ID: 1XTC with CTAsubunit remmonomer of the B subunit is show in a different color.，五聚体的 CTB 还可以以高亲和力结合到细胞表面的 GM1 受地与免疫系统作用。GM1 受体存在于所有有核哺乳动物细胞皮细胞，巨噬细胞，树突状细胞和 B 细胞[51-52]。图 1-3 所示道上皮细胞的表面，当在口服疫苗制剂中使用 CTB 时，C受体识别，结合在细胞膜上。


本文编号：3233298