约氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶6免疫血清对原虫有性阶段发育抑制作用的研究

发布时间：2021-06-23 06:26

　　为探讨约氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶6（Plasmodium yoelii Protein Phosphatase 6, PyPP6）作为传播阻断疫苗候选抗原的可行性,采用PCR扩增PP6优势抗原表位并克隆入pET32a（+）载体,诱导PyPP6重组蛋白（rPyPP6）表达与纯化,免疫小鼠获取抗-PyPP6免疫血清（anti-PyPP6）。采用ELISA和Western Blot方法检测anti-PyPP6血清效价和特异性,IFA检测PyPP6蛋白在约氏疟原虫各期定位,体内外实验检测anti-PyPP6血清对雄配子出丝、动合子形成和卵囊发育的影响。结果显示,成功诱导rPyPP6表达,anti-PyPP6血清抗体滴度为1:128000,PyPP6部分定位于约氏疟原虫质膜。与对照组相比,anti-PyPP6免疫血清1∶5倍稀释可显著抑制61.5%配子体出丝,动合子数目和动合子转化率分别降低了75%和19.7%,卵囊形成数量减少了35%。结果表明,PyPP6重组蛋白具有良好的免疫原性和抗原性,抗-PP6免疫血清具有显著的传播阻断效果。 

【文章来源】：寄生虫与医学昆虫学报. 2020,27(02)

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

IFA 检测PyPP6蛋白的亚细胞定位

与PBS组相比,抗-PyPP6免疫血清(1∶5)对配子体率及雌/雄配子体活化能力均无明显影响(图4-A和4-B)。但与对照组相比,抗-PyPP6血清处理组,雄配子出丝减少了61.5%(P< 0.05,图4-C),雄配子粘附雌配子能力下降44.6%(P<0.0001,图4-D),提示抗-PyPP6免疫血清可影响雄配子受精功能。2.5 抗-PyPP6免疫血清对体外动合子期原虫发育的影响

从图5-A可以看出,1∶5稀释的抗-PyPP6免疫血清处理组(PyPP6)动合子的形成数量明显减少了75%(P< 0.01),且动合子转化率下降了19.7%(P< 0.01,图5-B)。上述结果提示:抗-PyPP6免疫血清对体外动合子的形成及发育具有显著的抑制作用。2.6 抗-PyPP6免疫血清对卵囊形成数量的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]伯氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶6抗血清对原虫有性阶段发育抑制作用的研究[J]. 孙林,洪明阳,曹雅明,朱晓彤,崔立旺.  中国免疫学杂志. 2019(10)
[2]中缅边境流行区恶性疟原虫野生株驯化方式的研究[J]. 闫妍,韦焕苹,洪明阳,朱晓彤,曹雅明.  寄生虫与医学昆虫学报. 2018(04)



本文编号：3244424