激活PPARγ对大鼠ICH模型病灶周围脑组织小胶质细胞吞噬能力及CD36表达的影响

发布时间：2021-06-26 00:19

　　第一部分激活PPARγ对凝血酶活化的小胶质细胞吞噬能力及CD36表达的影响目的:探讨调控PPARγ对凝血酶活化的小胶质细胞吞噬能力及CD36表达的影响。方法:新生SD大鼠脑组织进行原代小胶质细胞培养,将培养成功并分离纯化的原代小胶质细胞随机分为4组:正常组（Control）、凝血酶刺激组（TH）、PPARγ激动剂组（RSG）、PPARγ抑制剂组（GW9662）。免疫荧光显微镜对OX42标记的小胶质细胞进行鉴定,激光共聚焦显微镜观察各组小胶质细胞吞噬红色荧光微球的能力,采用Western-Blot、RT-PCR检测各组PPARγ和CD36蛋白以及相应m RNA的表达水平。结果:免疫荧光显微镜检测到小胶质细胞纯化率在95%以上,激光共聚焦显示各组小胶质细胞均不同程度吞噬红色荧光微球,PPARγ激动剂组（RSG）较其它组明显增加,PPARγ抑制剂组（GW9662组）较激动剂组和正常对照组吞噬数量显著减少。Western-Blot和RT-PCR结果均显示各组有PPARγ、CD36蛋白及m RNA的表达,PPARγ激动剂组（RSG组）PPARγ、CD36蛋白及m RNA表达较正常组、凝血酶刺激组... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：88 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

原代小胶质细胞的培养（×100）

染色后见细胞核呈蓝色，散在分布，上述图片经Merge处理后重叠率达95%以上，证实镜下所见小胶质细胞占95%以上；一抗对照组可见FITC无细胞着色，DAPI染色可见细胞核，Merge重叠后未见细胞着色（见图2）图2 免疫荧光染色鉴定小胶质细胞（×200）注：OX42标记细胞后见小胶质细胞呈草绿色，DAPI标记细胞核为蓝色，两组图Merge后，重叠率在95%以上。3. 激光共聚焦显微镜对小胶质细胞吞噬能力的检测小胶质细胞作为中枢神经系统重要免疫细胞，在外界因素刺激下通常表现出吞噬作和炎症细胞作用，实验结果显示，在激光共聚焦显微镜下（×400）可见各组均表现出吞噬作用，TH组较组吞噬红色荧光微球数量增多，RSG组吞噬数量较Control和TH组明显增多

17能力明显强于其他组,而使用PPARγ拮抗剂后小胶质细胞吞噬能力明显下降，差异具有统计学意义（P<0.01）（见图3）。图3 激光共聚焦显微镜下各组小胶质细胞吞噬红色荧光微球注：RSG组吞噬红色微球较TH组和正常组增多，GW9662组吞噬的红色微球明显少于RSG组4. PPARγ的表达4.1 PPARγ蛋白的表达采用Western blot法检测PPARγ蛋白的表达，其结果显示PPARγ蛋白在Control组、TH组、RSG组以及GW9662组中均有表达，其中RSG组较其他组显著增加，明显高于TH组和Control组，统计学上均有差异（P<0.01）,TH组的表达较Control组增加，统计学上有差异（P<0.01），而在使用拮抗剂组的GW9662组较RSG组的表达下降


本文编号：3250242