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生殖支原体MgPa经CypA-CD147-ERK诱导人尿道上皮细胞分泌促炎症因子

发布时间:2021-06-29 01:15
  研究背景:生殖支原体(Mycoplasma genitalium,Mg)是由Tully等于1981年分离到的一种支原体。它是一类缺乏细胞壁但能够自我复制的最小原核细胞型微生物。Mg经由其膜蛋白结合在宿主细胞膜上,是介导Mg致病的基础。生殖支原体黏附蛋白(M.genitalium protein of adhesion,MgPa)是含量最多的膜蛋白,Mg可能经MgPa黏附或侵入宿主细胞从而引起致病。本课题组前期研究表明人尿道上皮细胞(SV-HUC-1)膜上的亲环蛋白(Cyclophilin A,CypA)是MgPa的受体蛋白,MgPa与其受体特异结合能介导Mg侵入宿主细胞,但其具体的致病机制尚未阐明。本课题旨在研究MgPa与宿主细胞膜上的CypA相互作用后对宿主细胞的影响,并揭示其可能的信号通路,从而为Mg的防治提供新的思路和靶点。研究目的:研究MgPa诱导SV-HUC-1分泌的胞外CypA(eCypA)与CD147相互作用,进而经ERK1/2-NF-κB通路诱导细胞分泌促炎症因子,以阐释Mg可能的致病机制。研究方法:(1)免疫印迹实验(Western blot,WB)和间接酶联免疫吸附... 

【文章来源】:南华大学湖南省

【文章页数】:81 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

生殖支原体MgPa经CypA-CD147-ERK诱导人尿道上皮细胞分泌促炎症因子


ELISA检测不同浓度MgPa诱导细胞分泌的eCypAFig.1TheeCypAsecretedbySV-HUC-1cellstreatedwithdifferentconcentrationofMgPaweredetectedusingELISA.Note:Thenote*indicatesp<0.05comparedwiththeNgroup,**indicatesp<0.01comparedwiththeNgroup,***

细胞,检测处理,细胞蛋白,刺激细胞


图 2 ELISA 检测 MgPa 处理 SV-HUC-1 细胞不同时间后 eCypA 的表达he expressions of eCypA in SV-HUC-1 cells treated with MgPa for different time were d..te: The note * indicates p<0.05 compared with the N group, ** indicates p<0.01 compared wgroup,icates p<0.001 compared with the N group WB 检测处理细胞不同时间后 CypA 和 CD147 的表达用 20μg/mL 的 MgPa 分别刺激 SV-HUC-1 细胞 0h、8h、16h、2 48h,提取细胞蛋白用 Western blot 法检测细胞刺激不同时间其47 的表达情况,结果如图 3 所示,随着 MgPa 刺激时间的增加,47 的表达逐渐增多,且当 MgPa 刺激细胞 32h 时,CypA 和 CD14高。

细胞,间接免疫荧光法,检测处理


图 3 WB 检测 MgPa 处理 SV-HUC-1 细胞不同时间后 CypA 和 CD147Fig. 3 The expression of CypAand CD147 in SV-HUC-1 cells treated with Mgwere measured by Western blot. Values are provided as fold increases control.4.4间接免疫荧光法检测处理不同时间后CypA和C4.4.1 间接免疫荧光法检测处理细胞不同时间后 CypA20μg/mL 的 MgPa 分别处理 SV-HUC-1 细胞 0h、12h用间接免疫荧光法检测 CypA 的表达情况,结果如图 4 所间的增加,CypA 的表达逐渐增加。


本文编号:3255416

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