建立稳定表达荧光素酶的B16R细胞系

发布时间：2021-07-15 00:43

　　目的建立稳定表达荧光素酶的小鼠黑色素瘤细胞系（B16R）,并构建适用于小动物活体成像观察的C57小鼠皮下移植瘤模型。方法利用脂质体将携带荧光素酶基因的质粒转染到小鼠黑色素瘤细胞株B16R中,用嘌呤霉素筛选出表达荧光素酶的单克隆细胞株B16R-Firefly luciferase（B16R-FLUC）,再用化学发光检测B16R-FLUC荧光素酶基因的表达,扩增培养后,接种于C57小鼠,建立C57小鼠皮下移植瘤模型,通过活体动物成像系统检测B16R-FLUC的成瘤性。结果化学发光方法检测出B16R-FLUC细胞中荧光素酶基因,动物活体成像系统检测出C57皮下移植瘤中荧光信号,B16R-FLUC有很好的成瘤特性。结论成功构建稳定表达荧光素酶的B16R细胞系,为客观性评价抗黑色素瘤新药的治疗效果提供了实验基础。 

【文章来源】：湖北科技学院学报(医学版). 2020,34(03)

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【部分图文】：

B16R-FLUC细胞荧光素酶基因的检测

B16R-FLUC细胞体内成瘤性的检测

由于B16R-FLUC细胞株中含有绿色荧光蛋白,故在荧光显微镜可观察到绿色荧光,如图1(封三)。嘌呤霉素筛选及单克隆筛选的细胞株生长状态良好,无污染,阳性细胞率高,待检测过表达Firefly luciferase后,可以大量扩增细胞,冻存细胞株,方便后续实验使用。2.2 B16R-FLUC细胞荧光素酶基因的检测


本文编号：3285228