赖氨酸乙酰转移酶KAT8在抗病毒免疫应答中的调控作用及机制研究

发布时间：2021-07-22 14:53

　　转录因子IRF3是病毒诱导的I型干扰素的产生和天然免疫应答所必需的,IRF3的转录活性受经典的翻译后修饰,比如磷酸化和泛素化的严密调控。我们的研究明确了一种非经典的翻译后修饰可以直接抑制IRF3的转录活性,负向调控抗病毒免疫应答。本研究中,我们利用小干扰筛选体系,发现赖氨酸乙酰转移酶8（KAT8）能够选择性抑制RNA及DNA病毒诱导的I型干扰素的产生。KAT8缺失的小鼠与同窝对照小鼠相比,具有更强的抗病毒感染的能力。分子机制上,KAT8直接与IRF3相互作用,并通过其MYST结构域介导IRF3K359赖氨酸位点发生乙酰化修饰。进一步,KAT8抑制IRF3向I型干扰素启动子区的募集,降低IRF3的转录活性。我们的研究揭示了 KAT8介导的IRF3 K359赖氨酸乙酰化修饰在负向调控抗病毒免疫应答中的重要作用。 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：132 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２．１?ＫＡＴ８真核表达载体截短体示意图??

图３．２．３小鼠腹腔巨噬细胞中，ＫＡＴ８干扰后产生??Ｆｉｇｕｒｅ?３．２．３?ＫＡＴ８?ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ?ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ?ｐｒｏｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ?ｉｎ?ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ?ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ??（Ａ）?Ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＫＡＴ８?ｉｎ?ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ?ｍａｓｉＲＮＡ?（ｓｉＣｔｒｌ）?ｏｒ?ＫＡＴ８－ｓｐｅｃｉｆｉｃ?ｓｉＲＮＡ?（ｓｉＫＡＴ８）．?（ａ，?ＴＮＦ?ａｎｄ?ＩＬ－６?ｍＲＮＡ?ｌｅｖｅｌｓ?ｉｎ?ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ?ｍａｃｒｏｌａｔｅｒ，?ｔｈｅｎ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＬＰＳ?（１００?ｎｇ／ｍｌ），?Ｐｏｌｙ（Ｉ：Ｃ）?ＭＯＩ）?ｏｒ?ＨＳＶ－１?（１０?ＭＯＩ）?ｆｏｒ?ｔｈｅ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｔｉｍｅｓ．ａｎｄ?ＩＬ－６?ｉｎ?ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ?ｏｆ?ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ?ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｔｈｅｎ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＬＰＳ?（１００?ｎｇ／ｍｌ），?Ｐｏｌｙ（Ｉ：Ｃ）?（１０?＾ｏｒ?ＨＳＶ－１１０?ＭＯＩｆｏｒ?ｔｈｅ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｔｉｍｅｓ．?＊＊Ｐ?＜?０．

图３１４?ＲＡＷ２６４．７细胞中，ＫＡＴ８缺失选择性促进病毒诱导的Ｉ型干扰素产生??Ｆｉｇｕｒｅ?３．２．４?ＫＡＴ８?ｋｎｏｃｋｏｕｔ?ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ?ｐｒｏｍｏｔｅｓ?ｔｈｅ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＩＦＮ－Ｉ?ｉｎ??ＲＡＷ２６４．７?ｃｅｌｌｓ??（Ａ）?Ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＫＡＴ８?ａｎｄ?Ｐ－ａｃｔｉｎ?ｉｎ?ＫＡＴ８－ＫＯ?ｏｒ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ＲＡＷ２６４．７??ｃｅｌｌｓ．?（Ｂ）?Ｑ－ＰＣＲ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＩＦＮ－Ｐ，?ＩＦＮ－ａ？?ＴＮＦ?ａｎｄ?ＩＬ－６?ｍＲＮＡ?ｉｎ?ＫＡＴ８－ＫＯ?（ＫＯ－??１＃，?ＫＯ－２＃）?ｏｒ?ｃｏｎｔｒｏｌ?（Ｍｏｃｋ）?ＲＡＷ２６４．７?ｃｅｌｌｓ?ｌｅｆｔ?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?（Ｍｅｄ）?ｏｒ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ??ＶＳＶ?（１?ＭＯＩ）?ｆｏｒ?ｔｈｅ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｔｉｍｅｓ．?（Ｃ）?ＥＬＩＳＡ?ｏｆ?ＩＦＮ－（３，?ＩＦＮ－ａ，?ＴＮＦ?ａｎｄ?ＩＬ－６?ｉｎ??ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ?ｏｆ?ＫＡＴ８－ＫＯ?（ＫＯ－１＃，?ＫＯ－２＃）?ｏｒ?ｃｏｎｔｒｏｌ?（Ｍｏｃｋ）?ＲＡＷ２６４．７?ｃｅｌｌｓ?ｌｅｆｔ??ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?（Ｍｅｄ）?ｏｒ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＶＳＶ?（１?ＭＯＩ）?ｆｏｒ?ｔｈｅ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｔｉｍｅｓ．?＊＊Ｐ?＜?〇．〇ｌ??ｔｗｏ－ｔａｉｌｅｄ?Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ?ｔ－ｔｅｓｔ?（Ｂ，Ｃ）．?Ｄａｔａ?ａｒｅ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ?ｏｆ?ｔｈｒｅｅ?ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ??ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ?ｗｉｔｈ?ｓｉｍｉｌａｒ?ｒｅｓｕｌｔｓ?（Ａ）?ｏｒ?ａ


本文编号：3297360