约氏疟原虫鸟苷酸环化酶GCα调控配子体激活的功能和蛋白结构分析

发布时间：2021-08-08 13:12

　　疟疾是按蚊叮咬人体而感染疟原虫所引起的传染性疾病,每年造成数亿感染病例和数十万死亡病例。疟原虫具有复杂的生活史,脊椎动物和按蚊两个宿主,无性生殖和有性生殖两种生殖方式。疟原虫在不同的发育阶段展现出不同的细胞形态和生理状态。按蚊吸食含有配子体的血液后,配子体进入中肠并在按蚊代谢物黄尿酸（xanthurenic acid,XA）的诱导下开始有性生殖,即配子体—配子—合子—动合子—卵囊—子孢子等发育过程。雌雄配子体激活形成雌雄配子是有性生殖的第一步,也是疟原虫完成全生活周期和病原传播的重要阶段。尽管已有研究证明在人疟原虫（恶性疟）和鼠疟原虫（伯氏疟）中,3’,5’-环化鸟苷一磷酸（cyclic guanosine monophosphate,cGMP）信号通路参与调控配子体的激活,但仍没有直接证据证明鸟苷酸环化酶α（Guanylate Cyclase α,GCα）是该信号通路中催化GTP产生cGMP的鸟苷酸环化酶。本课题基于对PyGCα蛋白结构和功能的分析,证明GCα蛋白在配子体激活过程中所起到的调控作用。首先我们构建了 gcα基因内源加标签虫株,对GCα蛋白进行全生活周期的表达分析显示,该... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：112 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１．恶性疟原虫生活史??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１．?Ｔｈｅ?ｌｉｆｅ?ｃｙｃｌｅ?ｏｉＰｌａｓｍｏｄｉｕｍ?ｆａｌｃｉｐａｍｍ［ｌｌ］．??

的信号通路在哺乳动物胃肠系统、血液循环系统和神经系统中都发挥重要的生理??功能，如促进血管和平滑肌舒张、抑制血小板凝聚、血管重塑、细胞凋亡和炎症??发生以及参与神经传递，光信号转导等（图１－２）?［４２４９］。??６??

?与哺乳动物中Ｇ－蛋白偶联的ＡＣｓ具有相似的拓扑结构，具有两个６ＴＭｓ，每一??个６ＴＭｓ后各有一个环化酶催化结构域（分别命名为Ｃ１和Ｃ２）（图１－３）；哺??乳动物ＡＣｓ?Ｃ２?ｄｏｍａｉｎ中酶活重要的氨基酸主要位于ＰｆＧＣｓ?Ｃｌ?ｄｏｍａｉｎ，而ＡＣｓ??Ｃｌ?ｄｏｍａｉｎ中与嘌呤结合或Ｍｇ２＋结合相关的氨基酸主要位于疟原虫ＰｆＧＣｓ?Ｃ２??ｄｏｍａｉｎ，此结果与１９９９年相符合。②在大肠杆菌中异源表达ＰｆＧＣｐ?ＧＣＤ证明??无腺苷酸环化酶活性，而具有鸟苷酸环化酶活性。③作者推测ＰｆＧＣｓ蛋白起源??于两个基因的融合表达，一个基因编码ＡＬＤ，?—个基因编码ＧＣＤ［５２］。２００１年??该课题组体外培养恶性疟配子体直至成熟后，将细胞裂解分离并通过Ｂｉｏｔｒａｋ?ｋｉｔ??测定ｃＧＭＰ合成水平发现膜组分中具有显著的鸟苷酸环化酶活性，证明ＰｆＧＣｓ??确实是完整的膜蛋白［５３］。??Ｐ－ｔｙｐｅ?ＡＴＰａｓｅ－Ｈｋｅ?ｄｏｍａｉｎ?Ｇｕａｎｙｌｙｌ?ｃｙｃｌａｓｅ?ｄｏｍａｉｎ??Ｔ?ＬＪＶＧＴＰｊｊ???３?ＥＴＳＬＬＮＧＥＴ＾?Ｃｙｃｌａｓｅ?Ｃ１??？?ＩＦＴＤＫＴＧＴＬＴ７６２?ｌ?Ｊ?〇?ＫＶＥＴＶ?咖?「Ｃｙｃｌａｓｅ?Ｃ２??〇?ＫＧＳＤ丨攸?、?ｙ?〇?ＱＹＡＬＦＣ；ＤＴＶＮＴＡＳＲＵ６Ｊ，??；ＳＥ〇＾ＰＫＴ

【参考文献】：
期刊论文
[1]50年来我国蚊媒研究进展[J]. 宋维华.  医药产业资讯. 2005(24)
[2]疟疾疫苗研究的现状和展望[J]. 潘卫庆.  第二军医大学学报. 2004(01)



本文编号：3330020