缺氧对大鼠肺成纤维细胞甲酰肽受体1表达的影响

发布时间：2021-08-28 16:08

　　目的研究缺氧对大鼠肺成纤维细胞甲酰肽受体1（formyl peptide receptor 1, FPR1）表达的影响。方法分离大鼠肺成纤维细胞,用48孔Boyden趋化小室观察大鼠成纤维细胞在不同浓度（0、10、100、1 000 nmol/L组）的FPR激动剂（fMLF）作用下的趋化能力。将细胞置于低氧培养箱中培养（1%O₂,5%CO₂,94%N₂,37℃）24 h,取细胞培养上清,结合FPR特异性拮抗剂tBoc处理,检测缺氧培养上清中FPR介导的趋化活性。将细胞分为常氧组[普通培养箱（5%CO₂,95%空气,37℃）]和缺氧组[置低氧培养箱中培养（1%O₂,5%CO₂,94%N₂,37℃）2、12、24 h],用免疫印迹、PCR检测大鼠肺成纤维细胞FPR1和FPR激活物膜联蛋白A1（annexin A1, AnxA1）的蛋白、mRNA水平。不同浓度fMLF作用下细胞中FPR1、AnxA1的蛋白水平。使用tBoc预处理细胞并缺氧2... 

【文章来源】：第三军医大学学报. 2020,42(06)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

Western blot检测fMLF处理后细胞FPR1、AnxA1的蛋白表达水平

Western blot检测缺氧和FPR拮抗剂对细胞FPR1、AnxA1的蛋白表达水平的影响

Western blot结果显示(图3),大鼠肺成纤维细胞表达FPR1,在1%的缺氧条件下缺氧12 h后FPR1的蛋白表达与缺氧0 h组相比显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05);缺氧2、24 h组与缺氧0 h组相比差异无统计学意义(P>0.05)。缺氧12、24 h与缺氧0 h组相,AnxA1的蛋白表达显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.05);缺氧2 h与缺氧0 h组相比,虽然蛋白表达增加,但无统计学意义(P>0.05)。PCR结果显示(图3),肺成纤维细胞缺氧2、12、24 h的FPR1、AnxA1的电泳条带与缺氧0 h组相比显著加深,而内参β-actin的变化不明显,通过灰度分析发现(图3),缺氧 2、12、24 h组FPR1、AnxA1的mRNA水平均较缺氧0 h 组显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。图2 细胞趋化实验检测大鼠肺成纤维细胞FPR的趋化活性

【参考文献】：
期刊论文
[1]敲低Runt相关转录因子3（RUNX3）抑制低氧诱导的内皮细胞间质转分化[J]. 刘艳华,李宾公,王裕勤,王得龙,邹晋,柯旋,郝艳琴.  细胞与分子免疫学杂志. 2016(12)



本文编号：3368830