氧化铁纳米粒子对DC抗原提呈功能的影响

发布时间：2017-05-01 14:02

  本文关键词：氧化铁纳米粒子对DC抗原提呈功能的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[目的]：口腔癌在恶性肿瘤中位列前十,在全身多系统恶性肿瘤中约占7%。2015年发布的全球癌症统计数据显示,2012年发展中国家新发口腔癌在男性患者全身系统肿瘤中位列第8,死亡人数位列男性全身系统性肿瘤第9。最近几十年来,虽然手术、放疗和化疗等传统方法在肿瘤治疗方面取得了较大的进步,但口腔癌的5年生存率仍然处于较低水平,徘徊在50%-55%之间。新兴的DC介导的免疫治疗在头颈癌的治疗方面显示出巨大的潜在价值。DC抗肿瘤免疫疗法成功与否,很大程度上依赖于DC的提呈效率。在本次实验中,我们使用氧化铁纳米颗粒负载DC,观察DC对材料的吞噬作用,研究氧化铁纳米粒子对DC凋亡,表面分子表达和分泌细胞因子等功能的影响,并检测氧化铁纳米粒子和经表面修饰后的氧化铁纳米粒子对DC抗原提呈功能的影响,综合评价氧化铁纳米粒子作为DC疫苗肿瘤抗原自佐剂运载体的应用前景。[方法]：提取小鼠骨髓细胞,运用细胞因子诱导方法培养DC。制备氧化铁纳米粒子。将不同浓度的纳米粒子负载给小鼠骨髓产生的DC。通过普鲁士蓝染色及细胞铁含量测定,检测DC负载氧化铁纳米材料的效率。采用流式细胞技术检测负载纳米材料DC表面分子的表达和DC凋亡情况。通过酶联免疫吸附实验检测DC的细胞因子分泌量。氧化铁纳米粒子负载给DC, DC与杂交瘤细胞B3ZCD8+T细胞混合温育,通过p-半乳糖苷酶(Chlorophenol Red-β-D-galactosidase, CPRG)测定实验验证氧化铁纳米粒子对DC抗原提呈功能的影响。带正电荷的3-氨丙基三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxysilane, APTS)和带负电荷的二巯基琥珀酸(dimercaptosuccinic acid, DMSA)分别修饰氧化铁纳米粒子,通过CPRG实验验证不同表面修饰氧化铁纳米粒子对于DC抗原提呈的影响。[结果]：培养至第7天的细胞集落较多,形态特征符合DC基本特征。诱导培养的DC表面分子CD11c阳性率达80%以上,CD80, CD86, MHCⅡ表达量均与成熟DC一致,符合实验要求。细胞几乎100%被蓝色的氧化铁纳米材料标记。随着氧化铁纳米粒子浓度的提高,DC含铁量不断增加。在浓度为0,10,25,50μg/ml,用氧化铁纳米粒子温育24小时后,DC凋亡比例和CD80, CD86, MHCⅡ等表面分子表达没有差异,CCR7表达下调。DC分泌细胞因子IL-12和IFN-γ能力不受氧化铁纳米粒子影响。DC的抗原提呈功能随着氧化铁纳米粒子浓度升高而增强。修饰APTS带正电荷的氧化铁纳米粒子相较于修饰DMSA带负电荷的氧化铁纳米粒子具有更强的促进DC提呈的能力。[结论]：经细胞因子诱导方法可以培养高纯度DC。氧化铁纳米粒子具有良好的标记DC的功能。氧化铁纳米粒子对DC的表面分子表达,凋亡及分泌细胞因子功能无显著性影响。更重要的是,它能够促进DC的抗原提呈能力,这表明氧化铁纳米粒子不仅具有示踪DC的功能,同时能够增强DC介导的免疫应答反应,表面修饰APTS的氧化铁纳米粒子促进DC抗原提呈能力作用更强,是一种潜在的多功能自佐剂纳米材料。
【关键词】：氧化铁纳米粒子 树突状细胞 APTS 抗原提呈
【学位授予单位】：南京大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R392.11
【目录】：

• 前言5-7
• 摘要7-9
• Abstract9-15
• 第一章 绪论15-24
• 1.1 肿瘤的免疫监视与逃逸16-17
• 1.2 肿瘤免疫治疗的发展17-18
• 1.3 纳米材料在肿瘤免疫治疗中的应用18-23
• 1.4 肿瘤免疫治疗面临的挑战与机遇23-24
• 第二章 氧化铁纳米粒子对DC抗原提呈功能的影响24-46
• 2.1 引言24-26
• 2.2 实验材料26-29
• 2.3 实验方法29-34
• 2.4 实验结果34-42
• 2.5 讨论42-46
• 全文总结46-47
• 参考文献47-51
• 致谢51-52
• 附录52-53

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1 刘开;氧化铁纳米粒子对DC抗原提呈功能的影响[D];南京大学;2016年

  本文关键词：氧化铁纳米粒子对DC抗原提呈功能的影响，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：339028