小蓟总黄酮对大、小鼠糖尿病模型的影响

发布时间：2017-05-03 04:17

  本文关键词：小蓟总黄酮对大、小鼠糖尿病模型的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:通过建立大、小鼠糖尿病模型来研究小蓟总黄酮提取物对大、小鼠糖尿病模型的治疗作用,并通过测定糖代谢指标、脂代谢指标、氧化应激指标等相关指标和观察胰脏组织的病理学形态学变化,初步探讨小蓟总黄酮提取物对大、小鼠糖尿病模型的治疗作用及作用特点。方法:采用腹腔注射四氧嘧啶的方法建立小鼠高血糖模型。购进动物,正常喂养3天,随机取12只作为空白组。其余根据体重,腹腔注射四氧嘧啶(5%,200mg/kg),72小时后,眼内眦静脉丛取血,测血糖值,筛选出血糖值大于11.1mmol/L的小鼠,根据血糖值随机均匀分为模型、二甲双胍混悬液、小蓟总黄酮混悬液高、中、低剂量5组。每组12只。分别灌服相应药物,空白组和模型组灌服相同体积0.1%(羧甲基纤维素)CMC,连续给药7天,于最后一次给药前12小时禁食不禁水,最后一次给药后两小时去眼球取血,测血糖;称取80mg肝脏,测肝糖原;取胰脏做病理切片。采用尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立小鼠糖尿病模型。购进动物,正常喂养3天,随机取12只作为空白组。其余根据体重,尾静脉注射10mg/m L STZ溶液(PH为4.2的柠檬酸缓冲液配制,80mg/kg),7日后眼眶静脉取血,测血清血糖值,选取血糖值在16.7mg/L-21.0mmol/L,并明显有多饮多食多尿症状的小鼠,根据血糖值均匀分成5组,二甲双胍混悬液组、小蓟总黄酮高、中、低剂量混悬液组,模型组。每天用给予相应药物灌胃给药,空白组和模型组用同体积0.1%CMC灌胃,每日1次,连续给药30天,在给药的第10、20、30天禁食12小时后测血糖值,第31天禁食后12h,灌胃给药,2h后,眼眶取血,分离血清,测血清中甘油三酯、总胆固醇、胰岛素、糖基化血清蛋白、活性氧簇的含量,称取80mg肝脏,测肝糖原含量;取胰腺、肝脏甲醛固定,做组织病理切片,观察病理组织变化。采用尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立大鼠糖尿病模型。购进的动物正常喂养3天,随机取14只作为空白组。其余根据体重,尾静脉注射10mg/m LSTZ溶液(PH为4.2的柠檬酸缓冲液配制,40mg/kg)7天后尾静脉取血,测血清血糖值,选取血糖值在16.7mg/L-21.0mmol/L,并明显具有多饮多食多尿症状的大鼠,根据血糖值均匀分为5组,分别为二甲双胍混悬液组、小蓟总黄酮高、中、低剂量混悬液组,模型组。并给予相应药物灌胃,空白组和模型组给予同体积0.1%CMC灌胃,每日1次连续给药30天。分别在给药的第10、20、30天禁食12h后尾静脉采血,分离血清,测血糖值,在第31天禁食后12h,灌胃2h后取血,分离血清,测血清中总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、一氧化氮、糖基化血红蛋白、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、活性氧(ROS)、胰岛素受体、丙二醛、谷胱甘肽过氧化氢酶的含量;取胰腺、肝脏甲醛固定,做组织病理切片,观察病理组织变化。结果:采用腹腔注射四氧嘧啶的方法造成小鼠高血糖模型。与模型组相比,二甲双胍和小蓟总黄酮可以降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠模型的血糖值(P0.05),增加肝糖原的含量(P0.01),抑制糖异生,维持血糖水平稳定,改善胰腺的病理变化。采用尾静脉注射STZ的方法造成小鼠糖尿病模型。与模型组相比,小蓟总黄酮可降低STZ所致小鼠模型的10天以后血糖值(P0.05),降低糖化血清蛋白含量(P0.05),降低总胆固醇(P0.01)的含量、降低甘油三酯的含量(P0.05)、降低活性氧簇活力(P0.01),升高肝糖原含量(P0.05),升高胰岛素含量(P0.01),改善胰腺、肝脏的病理变化。采用尾静脉注射STZ造成大鼠糖尿病模型。与模型组相比,小蓟总黄酮可降低STZ所致大鼠糖尿病模型的10天以后的血糖值(P0.05),降低糖化血清蛋白含量(P0.01),升高胰岛素分泌水平(P0.01),降低胰岛素抗体水平(P0.01),降低甘油三酯、总胆固醇含量(P0.01),降低低密度脂蛋白(P0.05),升高高密度脂蛋白(P0.01),增加血清超氧化物歧化酶(SOD)酶活力(P0.01),一氧化氮合酶(NOS)水平(P0.05),降低一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的水平(P0.01),提高过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化氢酶、SOD活力(P0.01),降低Bcl-2相关X蛋白(BAX)的含量(P0.01),B淋巴细胞瘤因子2含量升高(P0.01),降低H2O2含量,降低活性氧(ROS)的活力(P0.01);降低表达细胞色素C的m RNA含量(P0.05),改善胰腺、肝脏的病理变化。结论:小蓟总黄酮提取物对大、小鼠糖尿病模型有很好的保护作用。小蓟总黄酮提取物可降低血糖、糖化血清蛋白水平,降低甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白含量,升高肝糖原含量,从而改善机体的脂代谢紊乱;促进胰岛素分泌和肝糖原的合成,增加GSH-PX、H2O2含量,增强SOD的活性,降低ROS水平,降低NO、CAT含量,降低NOS活力,升高Bcl-2含量,降低BAX含量,降低血清中MDA水平,降低表达细胞色素C的m RNA含量以改善机体的氧化应激程度。可改善胰腺、肝脏的病理变化。综合起到保护糖尿病的作用。
【关键词】：大、小鼠 糖尿病模型 小蓟总黄酮 氧化应激 四氧嘧啶 链脲佐菌素
【学位授予单位】：河南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 实验一 小蓟总黄酮对四氧嘧啶致小鼠高血糖模型的影响13-19
• 1 实验材料13
• 1.1 实验试剂13
• 1.2 实验仪器13
• 1.3 实验动物13
• 2 实验方法13-15
• 2.1 造模与给药13-14
• 2.2 检测指标14-15
• 3 统计方法15
• 4 实验结果15-18
• 4.1 行为状态观察15
• 4.2 生化指标检测15-18
• 4.3 病理学观察18
• 5 小结18-19
• 实验二 小蓟总黄酮对链脲佐菌素致小鼠糖尿病模型的影响19-29
• 1 实验材料19-20
• 1.1 实验试剂19
• 1.2 实验仪器19-20
• 1.3 实验动物20
• 2 实验方法20-22
• 2.1 造模与给药20
• 2.2 观察指标20-22
• 3 统计方法22
• 4 实验结果22-28
• 4.1 行为状态观察22-23
• 4.2 生化指标检测23-27
• 4.3 病理学观察27-28
• 5 小结28-29
• 实验三 小蓟总黄酮对链脲佐菌素致大鼠糖尿病模型的影响29-50
• 1 实验材料29-30
• 1.1 实验试剂29-30
• 1.2 实验仪器30
• 1.3 实验动物30
• 2 实验方法30-36
• 2.1 造模与给药30-31
• 2.2 观察指标31-36
• 3 统计方法36-37
• 4 实验结果37-49
• 4.1 行为状态观察37
• 4.2 生化指标检测37-46
• 4.3 基因表达指标46-47
• 4.4 病理学观察47-49
• 5 小结49-50
• 讨论50-58
• 结论58-59
• 致谢59-60
• 参考文献60-64
• 附录1 附图64-70
• 附录2 文献综述70-77
• 参考文献75-77
• 附录3 论文发表情况77

【参考文献】

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本文编号：342326