BNP/BKCa通路在三叉神经痛模型大鼠三叉神经元中的作用
发布时间：2021-10-30 04:03
目的通过对SD大鼠行眶下神经压迫术（ION-CCI）,建立三叉神经疼痛模型,应用行为学检测、膜片钳技术等探究BNP/BKCa通路在大鼠三叉神经痛模型的三叉神经元中的作用。方法选取60只正常SD大鼠（120-150 g）进行五天的适应性喂养和刺激训练,筛选对一定量刺激反应平静且健康的正常大鼠,并随机分为两组:Sham组,ION-CCI组（各5只）。使用von Frey hair对大鼠触须垫处测量两组大鼠机械疼痛阈值并记录比较。模型建立成功后于第7天时将相应组别的大鼠麻醉后断头处死,取出三叉神经节急性分离出三叉神经细胞,用膜片钳检测Sham组,ION-CCI组,Sham组+Paxilline,ION-CCI组+BNP,Sham组+BNP中BKca通道电流密度大小。统计分析数据,探讨BNP/BKCa通路在疼痛模型中的作用。结果1、三叉神经痛模型大鼠构建成功后,测量结果表明ION-CCI组大鼠的机械疼痛阈值比Sham组显著降低,并在第7天时达到最低值（Sham组:（1.64±0.14）g,ION-CCI组:（0.10±0.02）g,n=5,P<0.0001）。2、正常三叉神经元细胞中BK...
【文章来源】：安徽医科大学安徽省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Sham组与ION-CCI组术后机械疼痛阈值的变化
安徽医科大学硕士学位论文.2 Paxilline 对大鼠三叉神经元细胞中 K+电流的影响钳制刺激电压每次增加 10 mV，从-40 mV 依次增加至+60 mV，行全细胞电录（图 2A）。Paxilline 是 BKCa 通道的特异性抑制剂，Paxilline（1 μmol/L，能够明显抑制三叉神经元细胞的 K+电流（图 2B），说明记录的 K+电流绝大为 BKCa 通道介导的 K+电流。在不同钳制刺激电压下（+20 mV 至+60 mV） Paxilline 处理后 BKCa 通道电流密度（电流密度 = 电流大小/膜电容）均显著降低（图 3）（P < 0.05，n = 5）。
图 3：钳制刺激电压从+20 mV 到+60 mV 时，Sham 组和经 Paxilline 处理后 Sham 组的 BKCa 电流密度统计图Figure 3: Quantification of BKCa current density in Sham group and Sham group treated with paxilline under voltageclamp stimulating from + 20 mV to + 60 mV3.3 Sham 组与 ION-CCI 组大鼠三叉神经元细胞中 BKCa 电流变化钳制刺激电压每次增加 10 mV，从-40 mV 依次增加至+60 mV，行全细胞电流的记录（图 4）。与 Sham 组相比（图 4A），ION-CCI 组 BKCa 通道电流明显降低（图 4B）。图 5 为不同钳制电压下（+20 m V 至 +60 m V）BKCa 通道电流密度统计结果。结果显示，当刺激电压在+30 mV 及以上时，ION-CCI 组电流密度显著性地低于 Sham 组（P < 0.05，n = 5）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]BNP信号通路在眶下神经损伤大鼠模型中的研究[J]. 张越,姚育智,朱大卫,王烈成,王元银. 安徽医科大学学报. 2018(08)
[2]Presynaptic inhibition of nociceptive neurotransmission by somatosensory neuron-secreted suppressors[J]. Kaicheng Li,Bing Cai,Changlin Li,Xu Zhang. Science China（Life Sciences）. 2017(09)
[3]大黄素增加BKCa通道β1亚基表达介导自发性高血压大鼠脑基底动脉舒张[J]. 张传林,丛丽娜,王蕊,王洋,马克涛,赵磊,司军强,李丽. 生理学报. 2014(03)
[4]慢性非细菌性前列腺炎大鼠前列腺平滑肌细胞BKCa通道对膜电位的影响[J]. 张震,梁朝朝,张贤生,郝宗耀,樊松,刘见辉. 中华男科学杂志. 2013(01)
本文编号：3466015
【文章来源】：安徽医科大学安徽省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Sham组与ION-CCI组术后机械疼痛阈值的变化
安徽医科大学硕士学位论文.2 Paxilline 对大鼠三叉神经元细胞中 K+电流的影响钳制刺激电压每次增加 10 mV，从-40 mV 依次增加至+60 mV，行全细胞电录（图 2A）。Paxilline 是 BKCa 通道的特异性抑制剂，Paxilline（1 μmol/L，能够明显抑制三叉神经元细胞的 K+电流（图 2B），说明记录的 K+电流绝大为 BKCa 通道介导的 K+电流。在不同钳制刺激电压下（+20 mV 至+60 mV） Paxilline 处理后 BKCa 通道电流密度（电流密度 = 电流大小/膜电容）均显著降低（图 3）（P < 0.05，n = 5）。
图 3：钳制刺激电压从+20 mV 到+60 mV 时，Sham 组和经 Paxilline 处理后 Sham 组的 BKCa 电流密度统计图Figure 3: Quantification of BKCa current density in Sham group and Sham group treated with paxilline under voltageclamp stimulating from + 20 mV to + 60 mV3.3 Sham 组与 ION-CCI 组大鼠三叉神经元细胞中 BKCa 电流变化钳制刺激电压每次增加 10 mV，从-40 mV 依次增加至+60 mV，行全细胞电流的记录（图 4）。与 Sham 组相比（图 4A），ION-CCI 组 BKCa 通道电流明显降低（图 4B）。图 5 为不同钳制电压下（+20 m V 至 +60 m V）BKCa 通道电流密度统计结果。结果显示，当刺激电压在+30 mV 及以上时，ION-CCI 组电流密度显著性地低于 Sham 组（P < 0.05，n = 5）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]BNP信号通路在眶下神经损伤大鼠模型中的研究[J]. 张越,姚育智,朱大卫,王烈成,王元银. 安徽医科大学学报. 2018(08)
[2]Presynaptic inhibition of nociceptive neurotransmission by somatosensory neuron-secreted suppressors[J]. Kaicheng Li,Bing Cai,Changlin Li,Xu Zhang. Science China（Life Sciences）. 2017(09)
[3]大黄素增加BKCa通道β1亚基表达介导自发性高血压大鼠脑基底动脉舒张[J]. 张传林,丛丽娜,王蕊,王洋,马克涛,赵磊,司军强,李丽. 生理学报. 2014(03)
[4]慢性非细菌性前列腺炎大鼠前列腺平滑肌细胞BKCa通道对膜电位的影响[J]. 张震,梁朝朝,张贤生,郝宗耀,樊松,刘见辉. 中华男科学杂志. 2013(01)
本文编号：3466015
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