巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导THP-1来源巨噬细胞极化的研究

发布时间：2022-07-03 17:28

　　目的分析巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导人单核细胞白血病THP-1细胞来源巨噬细胞的极化方向,探索机体对巴西日圆线虫感染的免疫应答机制。方法建立并维持巴西日圆线虫培养的实验室循环,无菌条件下收集L3和L5虫体,分别制备虫体蛋白;建立THP-1细胞体外培养体系,经500 ng/mL佛波酯（PMA）刺激培养后呈贴壁状态的MO型细胞分别采用500 ng/mL脂多糖（LPS）+100 ng/mLγ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）+IL-13（浓度均为100 ng/mL）、L3及L5虫体蛋白（浓度均为5 mg/mL）进行刺激,同时设不加任何刺激的阴性对照组。通过显微镜镜检观察刺激后细胞形态、实时荧光定量PCR（qPCR）检测M1/M2型巨噬细胞特异性基因mRNA表达水平、流式细胞术检测巨噬细胞表面标志物及酶联免疫吸附试验（ELISA）检测M1/M2型巨噬细胞分泌的细胞因子含量,观察巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导THP-1来源巨噬细胞的极化方向。结果 THP-1细胞经PMA刺激培养呈贴壁的MO型细胞后,经LPS+IFN-γ刺激培养后呈特征性M1型极化;经IL-4+IL-13刺激培养后呈特... 

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【参考文献】：
期刊论文
[1]旋毛虫成虫排泄-分泌蛋白对卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎的保护作用[J]. 袁圆,王黎源,梅娟,程洋,王伟,褚亮,唐洁,李楠,李徽徽,贺文欣,杨浪浪,陈杰,白永生,吴玥,梁金宝,孙思颖,张祥,杨小迪.  中国血吸虫病防治杂志. 2019(05)



本文编号：3655330