甘油二酯激酶ζ、蛋白激酶Cδ和Tis21在发育中大鼠脑的表达和定位

发布时间：2017-05-15 11:28

  本文关键词：甘油二酯激酶ζ、蛋白激酶Cδ和Tis21在发育中大鼠脑的表达和定位，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨甘油二酯激酶ζ(DGKζ)、蛋白激酶Cδ(PKCδ)和Tis21在大鼠胚胎脑的时空表达模式以及与脑发育的关系。方法:胚龄E9.5-E18.5大鼠胚胎各5只,连续切片用于免疫组织化学方法检测DGKζ、p-PKCδ和Tis21在大鼠胚胎脑的表达;22只胚龄E11.5、E12.5、E14.5、E16.5和E18.5的大鼠胚胎用于Western blotting,检测DGKζ、p-PKCδ、PKCδ和Tis21在大鼠胚胎脑组织的表达,成鼠的脑组织作为阳性对照。结果:1.免疫组织化学显示,E9.5,p-PKCδ和Tis21在神经沟的神经上皮呈阳性表达,而DGKζ为阴性表达;E10.5-E11.5,DGKζ、p-PKCδ和Tis21在脑泡壁均呈阳性表达;E12.5,三者均表达于端脑、间脑、中脑腹侧和脑桥处的神经上皮,而在中脑背侧、峡部和小脑原基处仅DGKζ呈阳性表达,p-PKCδ和Tis21呈阴性表达;E13.5,三者沿海马、隔、苍白球及嗅脑呈阳性分布,在新皮质呈阴性表达,p-PKCδ和Tis21在峡部和小脑原基出现阳性表达;E14.5,DGKζ的表达延伸到新皮质和脉络丛,在脑的各个区域呈现出全阳性。而p-PKCδ和Tis21的阳性表达仅延伸到中脑顶盖和脉络丛,在新皮质仍为阴性表达;E15.5,p-PKCδ和Tis21在新皮质出现阳性表达,在脑的各个区域均呈阳性;E16.5-E18.5,三者在小脑和脑桥表达范围缩小;DGKζ和p-PKCδ可表达在神经上皮细胞的胞浆,或胞浆和细胞核。2.蛋白免疫印迹结果显示,DGKζ和Tis21在E11.5-E14.5表达逐渐增多,E12.5较E11.5显著增多,在E16.5和E18.5逐渐下降;p-PKCδ/PKCδ显示PKCδ活性变化趋势与DGKζ和Tis21表达趋势一致。结论:1.DGKζ、p-PKCδ和Tis21的时空表达与脑的发育模式一致,DGKζ与p-PKCδ和Tis21的时空表达模式略有差异,但在E15.5时重合,提示DGKζ、p-PKCδ和Tis21协同参与脑的发育。2.E12.5和E14.5是大鼠胚胎脑内神经元发生的阶段,此时DGKζ和Tis21的表达以及PKCδ的活性显著增高,并且DGKζ和p-PKCδ表达在神经上皮细胞的胞浆和细胞核,提示核内DGKζ和PKCδ有抗增殖促分化作用,DGKζ/Tis21和PKCδ/Tis21是胚胎脑的发育过程中促进神经前体细胞分化的两条重要途径。
【关键词】：甘油二酯激酶ζ 蛋白激酶Cδ Tis21 脑 大鼠胚胎
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R321
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 1 材料与方法11-15
• 1.1 实验材料11
• 1.2 免疫组织化学染色11-12
• 1.3 蛋白免疫印迹12-14
• 1.4 统计学处理14-15
• 2 结果15-23
• 2.1 DGKζ、p-PKCδ和Tis21 在E9.5-E18.5 大鼠胚胎脑的表达15-22
• 2.2 DGKζ、p-PKCδ和Tis21 的蛋白免疫印迹测定22-23
• 3 讨论23-25
• 4 结论25-26
• 参考文献26-29
• 综述29-39
• 参考文献35-39
• 致谢39-40
• 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果40-41
• 个人简历41

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本文编号：367661