Nrf2-ARE通路在缺氧/吡那地尔后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用

发布时间：2023-01-04 11:03

　　目的:探讨核因子E2相关因子2（Nrf2）-抗氧化反应元件（ARE）通路在缺氧后处理和吡那地尔后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法:建立成年大鼠心肌细胞缺氧复氧模型,分离、培养心肌细胞,随机分为6组（n=8）:正常组（N组）、模型组（M组）、缺氧后处理组（IPO组）和不同浓度吡那地尔后处理组（P25组、P50组和P100组）。分离后的心肌细胞培养20 h后,除N组继续培养外,其余各组均缺氧45 min,复氧60min。IPO组缺氧45 min后复氧、缺氧循环3次,每次各5 min,在继续复氧60 min;P25组、P50组和P100组缺氧45 min后分别以25、50和100μmol/L吡那地尔处理5 min,复氧60 min。采用real-time PCR及Western blotting技术检测复氧末心肌细胞中Nrf2、血红素加氧酶1（HO-1）、NAD（P）H:醌氧化还原酶1（NQO1）和超氧化物歧化酶1（SOD1）mRNA及蛋白表达水平。结果:与N组比较,其它各组与Nrf2、NQO1、SOD1及HO-1的mRNA及蛋白质表达均降低（P＜0.05）;与M组比较,其它各... 

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【文章目录】：
材料和方法
    1 材料
        1.1 动物选择和分组
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器
    2 方法
        2.1 分离培养成年大鼠心肌细胞
        2.2 心肌细胞缺氧复氧模型的建立
        2.3 透射电镜下观察心肌细胞超微结构
        2.4 Real-time PCR检测心肌细胞Nrf2、血红素加氧
        2.5 Westem blotting法检测Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1蛋白的表达
    3 统计学处理
结果
    1缺氧/吡那地尔后处理对细胞超微结构的影响
    2缺氧/吡那地尔后处理对细胞Nrf2、NQO1、SOD1及HO-1 m RNA表达的影响
    3 缺氧/吡那地尔后处理对细胞Nrf2、NQO1、SOD1及HO-1蛋白表达的影响
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]抗氧化应激转录因子-Nrf2的研究进展[J]. 林晓萍,李雯,沈华浩.  中国病理生理杂志. 2011(06)



本文编号：3727658