电针对帕金森病模型大鼠纹状体星形胶质细胞活化与Cx43表达的影响研究

发布时间：2017-05-19 22:27

  本文关键词：电针对帕金森病模型大鼠纹状体星形胶质细胞活化与Cx43表达的影响研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:帕金森病(Parkinson’s Disease,PD)是中老年人群中最常见的慢性、病程呈进行性发展的神经系统退行性疾病,在老年人中有较高的患病率和致残率。我国现在罹患帕金森病的人数已超过100万,而在65岁以上的人群中,PD的发病率为2%,年龄越高患上PD的概率越大。随着我国步入老龄化社会,预计未来的20年我国的帕金森病患者将达到500万。PD在临床主要表现为静止性震颤、肌张力增高、运动迟缓和姿势反射障碍,部分患者还有智力的减退甚至残障,严重影响患者的健康和生存能力。PD的主要特征是中脑的黑质纹状体通路的功能减退,病理表现为黑质致密区多巴胺能神经元变性坏死并伴有胞浆内嗜酸性包涵体—路易小体(lewy bodies,LB)的形成。PD的发病机制目前仍不明确,在对多巴胺能神经元变性、死亡机制研究的过程中,发现在帕金森病患者和动物模型中的黑质致密部,除了已经发现的大量多巴胺能神经元缺失外,还有星形胶质细胞的激活。通过现有的研究结果,发现星形胶质细胞在帕金森病的发病过程中有一定作用。本课题采用立体定向注射法,向单侧的纹状体内两点微量注射六羟基多巴胺来制备大鼠旋转的PD模型,通过观察电针对帕金森病模型大鼠行为学的改变、黑质损毁侧酪氨酸羟化酶阳性神经元的计数、中脑损毁侧纹状体Glu浓度的变化以及GFAP、Cx43表达的影响,来探讨星形胶质细胞在大鼠黑质多巴胺能神经元损伤中的可能机制以及针刺干预的影响,以期为PD的针刺治疗开辟新的思路。方法:将140只健康雄性SD大鼠,随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组。正常组、假手术组各30只,模型组、电针组各40只。用微量注射法向大鼠右侧纹状体注射6-羟基多巴胺制备偏侧PD大鼠旋转模型,假手术组以生理盐水替代6-羟基多巴胺进行微量注射。正常组、模型组、假手术组不做任何治疗;电针组在造模的基础上电针“风府”“太冲”穴,采用连续波,频率2Hz,强度1mA,持续30min,一日一次,治疗两周。电针治疗结束后,(1)用旋转行为测试仪观察大鼠的旋转行为,(2)运用免疫组化检测损毁侧黑质TH阳性神经元的数目,(3)运用HPLC荧光法检测损毁侧纹状体Glu浓度,(4)采用RT-PCR法检测大鼠损毁侧纹状体部GFAPmRNA、Cx43mRNA表达的变化,(5)采用western-blot法检测损毁侧纹状体部GFAP、Cx43蛋白活性表达的变化。结果:(1)行为学观察,与模型组比较,电针组旋转行为明显改善(P0.01)。(2)与正常组、假手术组比较,模型组TH阳性神经元的数目明显减少(P0.01);与模型组比较,电针组TH阳性神经元的数目明显增多(P0.05)。(3)与正常组、假手术组比较,模型组Glu浓度显著升高(P0.01);与模型组比较,电针组Glu浓度显著降低(P0.01)。(4)与正常组、假手术组比较,模型组GFAPmRNA、Cx43m RNA表达显著升高(P0.01),与模型组比较,电针组GFAPm RNA、Cx43mRNA表达显著降低(P0.01)。(5)与正常组、假手术组比较,模型组GFAP、Cx43蛋白表达显著升高(P0.01),与模型组比较,电针组GFAP、Cx43蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:电针可以有效的改善PD大鼠的旋转行为,增加TH阳性神经元的数目,减少GLu的释放,并能抑制GFAP与Cx43蛋白的表达。提示星形胶质细胞的激活参与了PD的发生发展,其机制可能与其介导的Glu释放有关;电针干预可以有效的抑制星形胶质细胞的激活,减少Glu释放,保护多巴胺能神经元。
【关键词】：帕金森病(PD) 电针 星形胶质细胞 谷氨酸(Glu)
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R245;R-332
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-11
• 英文缩略词对照表11-12
• 前言12-14
• 材料与方法14-24
• 1 实验材料14-17
• 2 实验方法17-24
• 结果24-32
• 1 电针对PD模型大鼠行为学的影响24
• 2 免疫组织化学染色结果24-26
• 3 各组大鼠HPLC荧光法检测纹状体Glu浓度比较26-27
• 4 各组大鼠纹状体GFAPmRNA、Cx43mRNA表达的变化27-29
• 5 各组大鼠纹状体GFAP、Cx43蛋白活性表达的变化29-32
• 讨论32-43
• 1 中医学对帕金森病的认识32-33
• 2 现代医学对怕金森病的认识33-37
• 3 动物模型评价37-38
• 4 选穴依据38-39
• 5 星形胶质细胞GFAP、Cx43与帕金森病39-41
• 6 电针治疗PD的机理探讨41-43
• 结语43-44
• 参考文献44-53
• 综述53-65
• 参考文献59-65
• 致谢65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

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本文编号：380102