TRAB结构域包含蛋白2B在人类免疫缺陷病毒复制中的作用

发布时间：2024-02-03 20:53

　　目的探讨TRAB结构域包含蛋白2B (TRABD2B)对人类免疫缺陷病毒(HIV)复制的影响。方法实时PCR检测人原代细胞和细胞系中TRABD2B mRNA的表达水平;人TRABD2B表达质粒p TRABD2B-GFP转染293T细胞并通过荧光显微镜观察TRABD2B在293T细胞中的定位。采用小干扰RNA (siRNA)下调293T细胞中TRABD2B的表达,24 h后感染p24为10 ng的HIV-1_NL4-3-Luc (VSVG)假病毒并检测胞内荧光素酶活性。在293T细胞中共转染人TRABD2B表达质粒以及HIV-1_NL4-3、HIV-2st和SIV_mac239病毒质粒,或共转染不同种属TRABD2B表达质粒和HIV-1_NL4-3病毒质粒,48 h后收集上清感染TZM-bl细胞,检测TZM-bl细胞中的荧光素酶活性。结果人TRABD2B主要表达于293T细胞,且主要分布在293T细胞的胞膜;siRNA敲减293T细胞中内源性TRABD2B的表达能够促进HIV-1_NL4-3

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图1TRABD2B在细胞中的定位×100

实时PCR结果显示，293T细胞中TRABD2BmRNA表达水平高于CD4+T细胞、单核细胞和MDM细胞，差异有统计学意义[CD4+T细胞（0.09±0.07），单核细胞（0.10±0.07),MDM(0.27±0.04),293T细胞（5.38±1.05），均P<0.001....

本文编号：3894661