蛋白磷酸酶SCP4在TGFβ/BMP信号通路中功能与机制的研究

发布时间：2024-02-25 12:26

　　转化生长因子β (Transforming Growth Factor-β, TGFβ)超家族是一类多功能的细胞因子,它们在细胞增殖、分化、凋亡、胚胎发育和器官形成的过程中起着重要的调控作用。骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein, BMP),是TGFβ超家族中的一员,在多细胞动物中可以广泛调控细胞反应,包括细胞与组织的分化、形态的发生、四肢的发育、体轴的形成、原始生殖细胞的建立以及神经管的形成。BMP起始的信号通路的生物活性受到一系列严密的调控,包括在配体、受体、分泌的拮抗蛋白(如Noggin)和下游细胞内的效应蛋白Smad各个层面。Smad是经典的TGFβ/BMP信号通路中的核心信号转导蛋白。在经典的BMP信号通路中,配体诱导BMP I型受体对Smad1/5/8的C端SXS位点磷酸化是信号转导的关键步骤。SXS位点的磷酸化触发从细胞质中Smad复合体的组装到细胞核内转录调控等一系列细胞内事件。信号转导通路受到蛋白激酶和磷酸酶动态的相互调控,SXS位点也必须被磷酸酶去磷酸化以维持Smad信号通路活性和功能的平衡。本研究中,我们试图解决的一个关键问题就是S...

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【部分图文】：

图１．１?ＰＰＭＩＡ敲减增加了?Ｓｍａｄｌ的核内聚集

ＰＰＭ１Ａ的敲除导致了?Ｐ－Ｓｍａｄｌ蛋白水平下降趋势变缓，然而，仍然能看到了明显??的下降趋势。此过程中，Ｓｍａｄｌ总蛋白几乎没有变化，说明Ｐ－Ｓｍａｄｌ水平的降低??是缘于Ｓｍａｄｌ蛋白的去雖酸化而非总蛋白量的减少（图１．２Ａ）。我们将Ｗｅｓｔｅｒｎ??Ｂｌｏｔｔｉｎｇ结果用....

图１．３?ＳＣＰ４和ＰＰＭＩＡ敲减对Ｐ－Ｓｍａｄｌ蛋白水平表现为共同促进作用??细，?ｎ

■■■??ｒ＂■园团??图１．１?ＰＰＭＩＡ敲减增加了?Ｓｍａｄｌ的核内聚集。??稳定敲减细胞系Ｃ２Ｃ１２－ｓｈＰＰＭｌＡ或者对照Ｃ２Ｃ１２－ｓｈＣｏｎ比〇１用ＢＭＰ２?（１００?ｎｇ／ｍｌ）处理半小时，??洗去ＢＭＰ２并用ＤＭ刺激３０分钟。用Ｓｍａｄｌ抗体进行免《巧光，ＤＡＰＩ....

图１．４?ＳＣＰ４去攝暖化Ｓｍａｄｌ??ＨＥＫ２９３Ｔ细胞转染Ｍｙｃ－Ｓｍａｄｌ和ＦＬＡＧ－化ｇ的褚酸酶，为了激活Ｓｍａｄｌ的礎酸化，共转入??

第一部分??Ｉ．４，泳道３）。这与之前的文献报道相符（３５）。ＦＬＡＧ－ＳＣＰ４同样展示出降低Ｐ－Ｓｍａｄｌ??水平的能力（图１．４，泳道６）。然而，作为阴性对照的ＦＬＡＧ－ＰＰＭ１Ｄ和ＦＬＡＧ－ＳＣＰ１??没有表现出可探测到的Ｓｍａｄｌ磯酸化改变（图１．４，沫道４和５）。??Ｍ....

图１．５?ＳＣＰ４去雜酸化ＳｍａｄＳ??Ｔ细ＨＡ－ｍａ５ＦＡ－化，ａ５，??

?＜ＷＭＭｐ｜－ＰＰＰ１ＣＡ??１２?３?４??图１．６?ＳＣＰ４去雜酸化ＳｍａｄＳ??ＨＥＫ２９３Ｔ细胞转染ＨＡ－Ｓｍａｄ５和ＦＬＡＧ－ｔａｇ的礎酸酶，为了激活ＳｍａｄＳ的堵酸化，共转入ＡＬＫ３??（Ｑ２３犯），收集细胞用相应抗体进行Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｉｏ扣ｎｇ检测。??ＳＣＰ....

本文编号：3910308