泛素特异性蛋白酶USP39参与NF-κB/STAT3通路调控相关炎症因子的研究

发布时间：2024-02-24 19:31

　　泛素特异性蛋白酶 39(Ubiquitin Specific Peptidase 39,USP39)是去泛素化酶家族的一员。但由于其起催化作用的3个核心氨基酸残基(半胱氨酸、组氨酸、天冬氨酸/天冬酰胺)分别被天冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸所取代,导致USP39丧失了泛素水解酶活性。研究发现,USP39的功能主要体现在pre-mRNA的剪接上,且与乳腺癌,肝癌,前列腺癌等肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学功能密切相关,然而分子机制层面上的研究普遍不深,且有关USP39在炎症中与炎症相关信号通路及炎症因子的研究未见报道。我们首先用NF-κB信号通路的激活剂(TNF-α、LPS)和抑制剂(BAY11-7082)刺激细胞,激活或抑制NF-κB信号通路,结果显示,该通路对USP39的空间定位无影响,且该通路对USP39的mRNA水平与蛋白水平的作用相反,猜测可能存在USP39对NF-κB信号通路的负反馈来维持二者表达水平的稳定状态,或是NF-κB信号通路激活的情况下USP39蛋白降解加速,亦或是存在其他信号通路与NF-κB通路协同调控USP39的表达水平。为了研究是否存在NF-κB信号通路与US...

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 炎症相关信号通路
        1.1.1 NF-κB信号通路
        1.1.2 STAT信号通路
        1.1.3 NF-κB信号通路和STAT3信号通路在功能上的相关性
    1.2 泛素特异性蛋白酶USP39
        1.2.1 泛素特异性蛋白酶(USPs)家族的结构特征
        1.2.2 泛素特异性蛋白酶39(USP39)的结构特征
        1.2.3 泛素特异性蛋白酶39(USP39)的研究进展
    1.3 本课题的研究目的、内容与意义
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞系、质粒
        2.1.2 工具酶和抗体
        2.1.3 主要化学试剂和耗材
        2.1.4 细胞培养试剂
        2.1.5 仪器设备
        2.1.6 溶液配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 分子克隆实验
        2.2.2 细胞实验
        2.2.3 蛋白实验
        2.2.4 RNA水平实验
        2.2.5 免疫荧光实验
        2.2.6 数据处理
第三章 实验结果
    3.1 NF-κB信号通路与USP39的相互作用
        3.1.1 NF-κB信号通路对USP39的表达调控
        3.1.2 NF-κB信号通路对USP39的定位无影响
        3.1.3 USP39对NF-κB信号通路的活性调控
    3.2 USP39的敲低和回补对STAT3表达水平的调控
    3.3 USP39的不同结构域对STAT3转录水平的调控
    3.4 STAT3在肠癌细胞中发挥促炎作用
    3.5 USP39在肠癌细胞中发挥抑炎作用
        3.5.1 USP39在HCT116细胞株中发挥抑炎作用
        3.5.2 USP39在HT29细胞株中发挥抑炎作用
第四章 讨论
结论
参考文献
致谢



本文编号：3909512