糖肾康对DN干预作用的实验与临床研究及DN气阴两虚血瘀证动物模型的建立

发布时间：2017-05-24 18:05

  本文关键词：糖肾康对DN干预作用的实验与临床研究及DN气阴两虚血瘀证动物模型的建立，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:从实验角度证实糖肾康对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的保护作用,并探索和完善病证结合的DN气阴两虚血瘀证动物模型的制作方法。方法:用雄性SD大鼠50只,按单纯随机抽样的方法,分为正常组8只,模型大鼠42只,造模成功后的大鼠随机分为模型组、糖肾康组、贝那普利组、病证结合模型组(气阴两虚血瘀证动物模型)。各组大鼠实验前检测血糖、24h尿蛋白定量(24h UPr),结果阴性用于实验研究。除正常组8只大鼠之外,其余42只大鼠均采用手术+高糖高脂饮食+链脲佐菌素(STZ)三联法制作DN动物模型。造模成功后,正常组、模型组分别喂以固定动物饲料和自来水,糖肾康组将糖肾康溶于温水以1.6g/(200g·d)灌胃,贝那普利组将盐酸贝那普利片溶于温水以0.3mg/(200g·d)灌胃,各组大鼠每日灌胃一次,疗程为8周。病证结合模型组进一步制作气阴两虚血瘀证DN动物模型。各组实验大鼠实验结束后腹主动脉取血并摘取右侧肾脏,迅速称重后,置于中性甲醛液中固定,术前一天留24h尿量。用放射免疫法检测ACR;用双缩脲法检测24h UPr;酶偶联速率法测定血清BUN;用肌酐酶法测定血清Scr;用HE、Masson+PASM染色观察肾组织病理学变化。结果:1.治疗前后大鼠中医症状、体征变化情况:正常组大鼠饮水情况、精神状态、日常活动均正常,大鼠体重稳定增加;模型组大鼠STZ注射72h后,大鼠表现为多饮、多食、多尿,体重逐渐下降,体毛毛糙无光泽,蜷缩弓背等;随着时间延长,大鼠症状逐渐加重。糖肾康组大鼠摄食量及饮水量逐渐减少,精神状态较前明显好转,体毛较模型组有光泽,活动量逐渐增加,体重较稳定,较模型组好转。贝那普利组与糖肾康组有类似表现。病证结合模型组气阴两虚血瘀证造模成功后大鼠表现为饮水量增多、疲倦乏力、皮毛光泽度差、皮下瘀紫或青斑、消瘦加重。正常组大鼠无死亡,三联法造模过程中大鼠死亡5只,模型组死亡2只,死亡原因可能与注射STZ后产生的副作用有关;糖肾康组及贝那普利组实验过程中各死亡1只,死亡后解剖发现大鼠胃肠道严重梗阻,考虑与灌胃不当有关;病证结合模型组造模成功后大鼠死亡3只,死亡原因可能与气阴两虚血瘀证造模过程中加重大鼠病情有关。2.各组大鼠体重和肾脏肥大指数的比较:与同期正常组大鼠比较,其余各组大鼠的体重明显减轻(P0.01)。治疗第2周及第4周时,糖肾康组、贝那普利组及模型组比较均无显著性差异(P0.05)。治疗第6及8周时,糖肾康组及贝那普利组大鼠体重与模型组比较有显著性差异(P0.05或P0.01),糖肾康组与贝那普利组比较无显著性差异(P0.05)。肾脏肥大指数方面,与正常组比较,其余各组均显著增加(P0.01)。与模型组相比,糖肾康组和贝那普利组均减少(P0.01)。糖肾康组与贝那普利组比较差异无统计学意义(P0.05)。3.各组大鼠肾功能(BUN、Scr)比较:经单因素方差分析,各组大鼠BUN、Scr均无显著性差异(P0.05)。4.各组大鼠ACR、24hUPr的比较:与正常组比较,各组大鼠ACR、24hUPr均明显增多,具有显著性差异(P0.01);与模型组比较,糖肾康组和贝那普利组治疗4周及8周时均明显降低(P0.01),糖肾康组与贝那普利组比较无显著性差异(P0.05);糖肾康组及贝那普利组治疗8周时与治疗4周时比较均无显著性差异(P0.05),与治疗前比较差异均具有显著性(P0.05或P0.01)。5.肾组织病理形态学观察:⑴肾组织肉眼观察:正常组大鼠右侧肾脏大小正常,颜色暗红;模型组及病证结合模型组大鼠右侧肾脏体积明显增大;糖肾康组、贝那普利组大鼠右侧肾脏体积均较正常组大,但均较模型组小。⑵HE染色:正常组大鼠肾小球结构清晰,模型组及病证结合模型组大鼠肾小囊囊腔明显缩小,糖肾康组及贝那普利组大鼠肾小囊轻度缩小;各组大鼠肾小球系膜细胞及内皮细胞均未见明显增多。⑶Masson+PASM染色:肾小球基底膜表现:模型组较正常组明显增厚,表现为DN的基本病理改变;而病证结合模型组较模型组增厚更显著,可能与病程长以及制造证候模型关系密切;贝那普利组和糖肾康组基本相当,均较正常组稍增厚,但均较模型组显著减轻。系膜基质表现:模型组较正常组明显增多;而病证结合模型组较模型组增多更显著;贝那普利组和糖肾康组基本相当,均较正常组稍增多,但均较模型组显著减轻。结论:1.糖肾康能够改善DN模型大鼠的生存质量,减少DN大鼠的尿蛋白;2.糖肾康能够改善DN模型大鼠的肾脏病理表现;3.DN气阴两虚血瘀证动物模型造模成功。目的:通过观察糖肾康对DN气阴两虚血瘀证患者的临床疗效及治疗前后患者ACR及24h UPr的变化,从临床角度证实糖肾康对气阴两虚血瘀证DN患者具有肾脏保护作用。方法:选取2013年6月-2015年1月我科及内分泌科收治的DN气阴两虚血瘀证患者68例随机分为治疗组和对照组各34例,治疗过程中失访5例,其中治疗组2例,对照组3例,实际完成63例,并选取30例健康体检者作为正常组。两组患者均给予控制饮食、血糖及血压等综合治疗;治疗组在上述综合治疗基础上加用糖肾康,每日3次,每次1袋,疗程均为8周。观察两组患者疾病疗效、中医证候积分、ACR及24h UPr、肾功能、血糖等指标变化及不良反应的发生情况,根据实验结果进行统计学分析和疗效判定。结果:1.临床疾病疗效、中医证候疗效比较:治疗组的临床疾病疗效、中医证候疗效均优于对照组,差异均具有显著性(P0.05)。2.中医证候积分比较:治疗前两组患者中医证候积分值差异无统计学意义(P0.05);治疗组治疗4周及8周与治疗前中医证候积分值比较,差异均有统计学意义(P0.01);对照组治疗8周与治疗前中医证候积分值比较,差异有统计学意义(P0.01);治疗组治疗4周及8周中医证候积分值与对照组比较,差异具有显著性(P0.01);治疗组及对照组治疗8周积分下降幅度与治疗4周比较,差异均具有显著性(P0.01);治疗组治疗4周及8周中医证候积分下降幅度均明显优于对照组,差异具有统计学意义(P0.01)。3.ACR及24h UPr比较:治疗前两组患者ACR及24h UPr比较无显著性差异(P0.05);治疗组治疗前、治疗4周及8周ACR、24h UPr比较均有显著性差异(P0.01);对照组治疗8周ACR、24h UPr与治疗前比较有显著性差异(P0.01),治疗8周ACR及24h UPr与治疗4周比较有显著性差异(P0.05);治疗组治疗4周ACR及24h UPr与对照组比较有显著性差异(P0.05),治疗8周ACR及24h UPr与对照组比较有显著性差异(P0.01)。4.肾功能(BUN、Scr)和血糖(FPG、2hPG、HbA1C)比较:两组患者治疗前、治疗4周及8周肾功能和血糖比较均无显著性差异(P0.05);治疗组治疗后肾功能和血糖与对照组比较亦无显著性差异(P0.05)。结论:糖肾康可显著改善DN气阴两虚血瘀证患者的临床症状、降低尿蛋白,具有一定的肾脏保护作用。
【关键词】：糖尿病肾病 气阴两虚血瘀证 糖肾康 尿蛋白 气阴两虚血瘀证 24h尿蛋白定量 糖肾康
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R-332;R259
【目录】：

• 缩略词表7-8
• 第一部分 实验研究8-33
• 中文摘要8-11
• Abstract11-15
• 1 前言15-16
• 2 研究方法16-22
• 2.1 实验动物16
• 2.2 实验用药16
• 2.3 实验仪器16-17
• 2.4 主要试剂17
• 2.5 造模方法17-19
• 2.5.1 DN大鼠模型17-18
• 2.5.2 气阴两虚血瘀证DN大鼠模型18
• 2.5.3 给药方法18-19
• 2.6 标本留取19
• 2.7 肾脏病理切片制备19-20
• 2.7.1 HE染色19-20
• 2.7.2 Masson+PASM染色20
• 2.8 观察指标及检测方法20-21
• 2.8.1 大鼠一般情况20-21
• 2.8.2 大鼠体重及肾脏肥大指数21
• 2.8.3 ACR及 24h UPr21
• 2.8.4 肾功能21
• 2.8.5 肾组织病理形态学观察21
• 2.9 统计学处理21-22
• 3 结果22-28
• 3.1 各组大鼠的一般情况比较22
• 3.2 各组DN大鼠体重和肾脏肥大指数的比较22-24
• 3.3 各组大鼠BUN、Scr比较24
• 3.4 各组DN大鼠ACR、24h UPr比较24-26
• 3.5 各组大鼠肾脏病理组织学观察26-28
• 3.5.1 肾组织肉眼观察26-27
• 3.5.2 HE染色27
• 3.5.3 Masson+PASM染色27-28
• 4 讨论28-32
• 4.1 DN的中医病机及益气养阴化瘀法的干预作用28-29
• 4.2 DN大鼠模型的建立依据29
• 4.3 阳性对照药物贝那普利的选择29-30
• 4.4 糖肾康对DN模型大鼠的影响30-31
• 4.4.1 改善生存质量30
• 4.4.2 减少尿蛋白30
• 4.4.3 减轻肾脏病理损害30-31
• 4.5 气阴两虚血瘀证DN大鼠病证结合模型建立的意义及其依据31-32
• 5 结论32
• 6 问题与展望32-33
• 第二部分 临床研究33-57
• 中文摘要33-35
• Abstract35-37
• 1 前言37-38
• 2 研究方法38-44
• 2.1 病例选择标准38-39
• 2.1.1 中医辩证标准38
• 2.1.2 中医症状量化评分标准38-39
• 2.1.3 西医诊断标准39
• 2.2 研究病例标准39-40
• 2.3 病例分组40-41
• 2.4 治疗方案41
• 2.5 观察指标41-42
• 2.6 疗效判定标准42-43
• 2.6.1 疾病疗效判定标准42
• 2.6.2 中医证候疗效判定标准42-43
• 2.7 统计学处理43-44
• 3 结果44-52
• 3.1 临床疾病疗效比较44
• 3.2 中医证候疗效比较44-46
• 3.3 中医证候积分值比较46-48
• 3.4 治疗前后ACR及 24h UPr比较48-49
• 3.5 治疗前后BUN、Scr的比较49-50
• 3.6 治疗前后FPG、2h PG、Hb Al C的比较50-51
• 3.7 两组患者安全性指标变化51-52
• 4 讨论52-56
• 4.1 现代医家对DN病机的认识52-54
• 4.2 糖肾康组方的理论依据及前期研究54-55
• 4.3 糖肾康组方特点55
• 4.4 糖肾康临床疗效评价55-56
• 4.4.1 改善临床症状55
• 4.4.2 减少尿蛋白55-56
• 5 结论56
• 6 问题与展望56-57
• 参考文献57-62
• 综述62-70
• 参考文献67-70
• 致谢70-71
• 个人简介及发表文章71-72
• 附图72-73

【参考文献】

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本文编号：391545