模拟衰老大鼠星形胶质细胞条件培养基对神经干细胞增殖能力的影响

发布时间：2024-03-09 22:32

　　目的建立大鼠星形胶质细胞衰老模型,模拟老年大鼠体内星形胶质细胞衰老,探讨衰老的星形胶质细胞条件培养基对神经干细胞增殖能力的影响。方法采用胰酶消化法分离新生1 d大鼠皮层星形胶质细胞和15 d胎鼠端脑神经干细胞,200μmol/L H₂O₂诱导星型胶质细胞4 h建立衰老模型;收取培养3 d和7 d衰老细胞上清作为条件培养基,以1∶3或1∶2的比例加入神经干细胞增殖培养基中,通过神经干细胞及神经球计数观察对增殖功能的影响,以正常星型胶质细胞条件培养基作为对照。结果 3 d正常条件培养基对神经干细胞短期增殖无影响,对长期增殖有抑制作用; 3 d衰老条件培养基抑制神经干细胞的增殖; 7 d正常条件培养基促进神经干细胞短期增殖,对长期增殖有抑制作用; 7 d衰老条件培养基抑制神经干细胞的增殖,抑制作用大于正常条件培养基。结论 H₂O₂诱导衰老的星形胶质细胞抑制神经干细胞的增殖,对长期增殖的抑制作用大于正常星形胶质细胞。

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【部分图文】：

图1大鼠原代星形胶质细胞和神经干细胞(×200)

通过MTT法测定AS增殖活性，结果显示不同浓度细胞接种后在第3～5天为对数生长期，增殖速度较快，之后慢慢降低，其中细胞浓度在2.5×104、5×104/mL时始终保持稳定增长，见图2。图2大鼠星形胶质细胞生长曲线

图2大鼠星形胶质细胞生长曲线

图1大鼠原代星形胶质细胞和神经干细胞(×200)2.2H2O2诱导大鼠星形胶质细胞衰老

图3H2O2诱导星形胶质细胞衰老

结果显示，加入3d条件培养基，ACM2组、SACM1组和SACM2组均可使神经球数量减少(P<0.05)，条件培养基的含量越高，神经球数量越少，直径越大，见图4A、B。消化为单个细胞计数结果显示，ACM组神经干细胞的数量变化没有显著性差异，而SACM1组神经干细胞数量降低(18....

图43d条件培养基对NSC短期增殖功能的影响

图3H2O2诱导星形胶质细胞衰老加入7d条件培养基，ACM或者SACM均可使神经球数量减少(P<0.05)，条件培养基的含量越高，神经球数量越少，直径越大，见图5A、B。消化为单个细胞计数结果显示，ACM2组神经干细胞数量增加(22.21±7.02)%,SACM2组降低(24....

本文编号：3923961