铜绿假单胞菌双链RNA噬菌体phiYY分离鉴定及其应用基础研究

发布时间：2024-03-21 02:50

　　噬菌体(bacteriophage,phage)是一类能侵染细菌的病毒,其结构简单、个体微小、数量庞大、分布广泛。噬菌体能特异性侵染并杀灭细菌,是一种潜在的抗菌因子,可用于预防和控制细菌感染,即噬菌体治疗(phage therapy)。除噬菌体颗粒外,噬菌体编码产物,如溶菌酶(lysozyme),在抗细菌感染方面也具有较大的应用价值。目前发现和研究最多的噬菌体为双链DNA(dsDNA)有尾噬菌体,而关于双链RNA(dsRNA)噬菌体的报道较少。迄今为止,完成全基因组测序的噬菌体超过1900株,其中dsRNA噬菌体仅有6株(phi6、phi8、phi12、phi13、phi2954和phiNN),且这6株噬菌体均为囊膜噬菌体(Cystoviridae),其宿主主要是植物细菌丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)。铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是一种革兰阴性杆菌,于环境中广泛分布。在临床上,该菌是一种常见的条件致病菌,也是导致院内感染的重要细菌之一。铜绿假单胞菌可通过固有耐药和获得性耐药等方式抵抗抗生素治疗,使得临床治疗铜绿假单胞菌感染尤为棘...

【文章页数】：131 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图2-1噬菌体的筛选与分离A：噬菌体的噬斑形态

现透明溶菌环则认为该菌能被噬菌体phiYY裂解）。该试验重复三次。结果2.3.1铜绿假单胞菌噬菌体的分离以分离自西南医院烧伤科的铜绿假单胞菌临床株PA038作为宿主菌，以西南理的污水作为噬菌体筛选样本。为了增加获得目标噬菌体的概率，我们将去的污水与宿主菌共同培养，并....

图2-2氯仿试验

图2-2氯仿试验A：氯仿处理后的噬菌体。B：原始噬菌体。氯仿处理后的噬菌体于电镜下观察发现径约为50nm（图2-3A），而氯仿处理的正二十面体（图2-3B）。根据噬菌体科（Cystoviridae）[9]。

图2-3电镜形态

图2-2氯仿试验A：氯仿处理后的噬菌体。B：原始噬菌体。噬菌体以及氯仿处理后的噬菌体于电镜下观察发现，原始噬菌状结构，直径约为50nm（图2-3A），而氯仿处理后的噬菌体表现为标准的正二十面体（图2-3B）。根据噬菌体形态分类，囊膜噬菌体科（Cystoviridae）....

图2-4噬菌体一步生长曲线的绘制

图2-4噬菌体一步生长曲线的绘制菌体全基因组测序凝胶电泳表明，该噬菌体的基因组表现为三个条带（图2-5）分别处理噬菌体基因组，发现该噬菌体基因组能被RNaseA降照组均未发生降解（图2-6），由此可以认为该噬菌体的基因的氯仿试验结果显示其为有囊膜的噬菌体且基因组的电....

本文编号：3933709