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MMP9通过结合IFNAR1抑制IFN/JAK/STAT通路促进EV71复制

发布时间:2024-04-09 22:38
  肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)是手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)最重要的病原体,均属于小RNA病毒科肠道病毒属的A型,二者能够引起中枢神经系统(Central nervous system,CNS)损伤,对婴幼儿的健康构成巨大的威胁,但二者进入CNS的机理仍不清楚。在之前的研究结果中,我们发现EV71和CA16感染后,miR-1303的表达受到抑制,从而靶向调控基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinases 9,MMP9),使MMP9显著上升,并证实MMP9可以降解细胞与细胞之间的连接分子从而改变血脑屏障(Blood brain barrier,BBB)的通透性,使更多的病毒、炎性因子和炎性细胞浸润,最终导致CNS损伤。基于之前的研究,我们将进一步探究MMP9是否对已经在CNS中建立感染的病毒存在影响。本研究主要关注EV71感染后,MMP9在天然免疫反应中的作用。我们选取神经系统中的免疫细胞-小胶质细胞(Human micr...

【文章页数】:72 页

【学位级别】:硕士

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中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 手足口病的研究现状
    1.2 肠道病毒71型
        1.2.1 EV71的病毒学特征
        1.2.2 EV71的复制机制
        1.2.3 EV71的致病机理
        1.2.4 EV71诱发的天然免疫反应
    1.3 基质金属蛋白酶9
        1.3.1 基质金属蛋白酶
        1.3.2 MMP9与免疫反应
    1.4 选题的目的、意义及拟解决的问题
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 质粒、菌株、细胞株及毒株
        2.1.2 实验试剂
        2.1.3 主要实验仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 Vero细胞的复苏、传代及冻存
        2.2.2 16HBE、SHSY5Y、HM1900细胞的复苏培养及冻存
        2.2.3 病毒的扩增及收获
        2.2.4 病毒滴度测定
        2.2.5 DH5α感受态的制备
        2.2.6 转化感受态细胞
        2.2.7 阳性质粒的提取
        2.2.8 细胞样品的制备
        2.2.9 蛋白样品的制备
        2.2.10 Western Blot检测
        2.2.11 免疫荧光
        2.2.12 免疫共沉淀
        2.2.13 Caspase-1活性检测
        2.2.14 数据统计
第三章 结果与分析
    3.1 小胶质细胞中干扰MMP9后对EV71复制的影响
    3.2 SHSY5Y与16HBE细胞中干扰MMP9后对EV71复制的影响
    3.3 MMP9对干扰素产生的影响
    3.4 MMP9对IFNAR1的影响
    3.5 MMP9对JAK/STAT通路的影响
    3.6 MMP9对炎性细胞因子产生的影响
    3.7 结论
第四章 讨论与展望
参考文献
非论文综述 病毒感染与干扰素反应的研究进展
    参考文献
附录
致谢
研究生简历
硕士期间参与发表的文章



本文编号:3949736

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