单侧学习形成双侧记忆的神经元电生理研究

发布时间：2017-05-26 21:11

  本文关键词：单侧学习形成双侧记忆的神经元电生理研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究经单侧学习形成双侧记忆的C57BL-6-gfp小鼠,其barrel区锥体神经元和GABA能抑制性神经元内在特性及突触传递效率的变化。方法:1.造模:选取出生10天的C57BL-6-gfp小鼠(以下简称小鼠),同时给予5Hz右侧胡须刺激和乙酸丁酯嗅觉刺激,两小时一次,每天5次,连续训练10天。2.行为学实验:实验分为两组,分别为空白对照组及联合训练组(WS+OS)。行为学实验包括T迷宫实验及胡须频率实验。T迷宫实验:将联合训练组小鼠及空白对照组小鼠分别进行T迷宫实验,即给予5Hz触觉刺激后小鼠立即进入T迷宫,对小鼠回避一侧乙酸丁酯的方向性进行记录。胡须频率实验,联合训练组和空白对照组小鼠造模期间,每天给予嗅觉刺激后立即拍摄视频,应用分析软件对两组小鼠双侧胡须频率分别统计记录。3.电生理实验:将经检测造模成功后的联合训练组小鼠及空白对照组小鼠进行电生理实验。电生理实验具体流程为:小鼠异氟烷吸入麻醉后,迅速断头取脑,用切片机做冠状切片,每片400μm;将切好后的脑片置于已配好的氧合人工脑脊液(ASCF)中(温度为25°C,提前配好)孵育45-60分钟;孵育完成后将其转移至灌流槽,30°C对脑片进行灌流;应用光学显微镜及荧光显微镜定位小鼠双侧barrel区谷氨酸能神经元及GABA能神经元;使用Axonclamp-200B放大器及数模转换器,全细胞模式下记录电流钳指标及电压钳指标,研究小鼠双侧barrel区锥体神经元及GABA能神经元胞体功能变化及突触传递效率的变化,使用Clamp10.1进行数据统计分析。结果:1.行为学实验结果:1)T迷宫实验结果:联合训练组小鼠回避乙酸丁酯的概率高于空白对照组小鼠;2)胡须频率实验结果:联合训练组小鼠左右侧胡须频率均高于空白对照组小鼠,且刺激侧胡须频率高于未刺激侧侧胡须频率。2.电生理实验结果:a)电流钳实验结果:1)锥体神经元:与空白对照组相比,联合训练组双侧胡须对应barrel区的能障降低、动作电位间距缩小、绝对不应期缩短、单位时间内动作电位发放个数增加;且刺激侧胡须对应barrel区与对侧胡须barrel区相比,能障降低、动作电位间距缩小、绝对不应期缩短、单位时间内动作电位发放个数增加。2)GABA能神经元:与空白对照组相比,联合训练组双侧胡须对应barrel区的能障升高、动作电位间距增加、绝对不应期延长、单位时间内动作电位发放个数减少;且刺激侧胡须对应barrel区与对侧胡须barrel区相比,能障升高、动作电位间距增加、绝对不应期延长、单位时间内动作电位发放个数减少。b)电压钳实验结果:1)锥体神经元:与空白对照组相比,联合训练组双侧胡须对应barrel区的s EPSC(自发性兴奋性突触后电流)的间距缩短、幅度增加;且刺激侧胡须对应barrel区与对侧胡须barrel区相比,s EPSC的间距变化不大、幅度增加。与空白对照组相比,联合训练组双侧胡须对应barrel区的s IPSC(自发性抑制性突触后电流)的间距增大、幅度减小;且刺激侧胡须对应barrel区与对侧胡须barrel区相比,s IPSC的间距变化不大、幅度减小。2)GABA能神经元:与空白对照比相比,联合训练组双侧胡须对应barrel区的s EPSC的间距增大、幅度减小;且刺激侧胡须对应barrel区与对侧胡须barrel区相比,s EPSC的间距变化不大、幅度减小。结论:1.单侧学习后记忆可在双侧储存;且此种储存方式为不对称储存。2.这种单侧触须刺激后双侧储存的不对称储存方式,其大脑皮层双侧barrel区锥体神经元和GABA能神经元内在特性发生了变化。锥体神经元突触后神经元兴奋性均提高,GABA能神经元抑制性均降低,且触须刺激侧对应的barrel区的锥体神经元突触后神经元的兴奋性较另一侧的兴奋性更高。3.大脑皮层双侧barrel区之间可能有直接联系。
【关键词】：联合式学习记忆 barrel区 锥体神经元 GABA能神经元
【学位授予单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R338
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 1.引言10-12
• 2.材料与方法12-17
• 3.结果17-28
• 4.讨论28-32
• 5.结论32-33
• 6.参考文献33-37
• 7.致谢37-38
• 附录A 英文缩略语对照表38-39
• 附录B 常用试剂配制39-41
• 附录C 个人简历及发表论文41-42
• 附录D 综述42-49
• 参考文献47-49

【参考文献】

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  本文关键词：单侧学习形成双侧记忆的神经元电生理研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：398090