miR-335对牙囊细胞成骨分化能力的影响

发布时间：2024-12-11 03:33

　　目的:体外研究大鼠牙囊干细胞成骨分化能力,根据miR-335成骨相关基因表达量的改变情况,从而明确miR-335对牙囊干细胞的成骨分化的作用。方法:双向差速法体外分离培养大鼠牙囊干细胞,进行成骨诱导。用茜素红染色检测成骨分化的能力,进而用PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测miR-335的表达,并在瞬时转染miR-335 mimics(pre-miR-335)or inhibitor(anti-miR-335)后成骨诱导,用PCR和western-blot的方法检测成骨能力的改变。结果双向差速法培养的牙囊干细胞具有成骨样细胞分化能力。成骨诱导的牙囊干细胞中miR-335表达降低,转染miR-335 mimics后成骨能力降低,转染miR-335 inhibitor后成骨能力升高。结论:双向差速法培养的大鼠牙囊干细胞,可向成骨分化。在体外条件miR-335可以抑制牙囊干细胞的成骨分化。

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
内容与方法
    1 实验材料
        1.1 研究对象
        1.2 主要试剂及配制方法
        1.3 RNA提取及RT-qPCR所需主要试剂
        1.4 western-blot相关主要试剂及耗材
        1.5 Western-blotting主要试剂的配制
        1.6 本研究所使用的主要仪器
    2 实验前期准备
        2.1 牙囊干细胞的分离培养
        2.2 实时荧光定量PCR检测miR-335的表达
        2.3 miR-335瞬时转染
        2.4 Real-timePCR转染效率检测
        2.5 成骨相关基因检测
        2.6 蛋白质表达水平的检测
    3 质量控制
    4 统计学方法
    5 技术路线
结果
讨论
小结
致谢
参考文献
综述
    参考文献
攻读硕士学位期间发表的学位论文
导师评阅表



本文编号：4016120