Hippo通路调节端粒酶催化亚基hTERT表达的分子机制研究

发布时间：2025-01-11 00:42

　　端粒酶是合成端粒DNA,维持端粒长度和基因组稳定性的逆转录酶,与细胞衰老和肿瘤发生发展密切相关。端粒酶的活性调节及功能机制尚未阐明。Hippo信号通路的核心部分是由蛋白激酶MST1/2、LATS1/2组成的激酶链,该激酶链磷酸化并抑制转录共激活因子YAP和TAZ,从而调控基因表达,并在器官大小调控、组织再生、肿瘤发生发展等过程中发挥重要作用。近期研究发现,溶血磷脂酸LPA可以抑制Hippo通路的激酶LATS1/2,促进YAP的激活。本实验室早期研究发现LPA可以诱导端粒酶催化亚基hTERT的表达及端粒酶活性,但其机制并未深入研究。这提示了Hippo信号通路可能参与hTERT的调控。我们研究发现,当用LPA处理细胞,Hippo信号通路受到抑制使YAP去磷酸化入核时,hTERT mRNA和蛋白的表达水平升高。转染YAP激活型突变体以及敲除YAP上游激酶LATS1/2,都可以提高hTERT mRNA和蛋白的表达。反之,在LATS1/2敲除的细胞系中敲低YAP,hTERT表达水平降低。我们通过荧光素酶报告基因实验表明,YAP与转录因子TEAD的结合可以激活hTERT的启动子活性,同时确定了其潜在...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1多个转录因子及组蛋白修饰促进与抑制hTERT转录

图2Hippo信号通路受多种信号调节[68]

杭州师范大学硕士学位论文绪论变细胞张力来调节Hippo途径；顶端和基底外侧血影蛋白网络均可作为Hippo通路调节中机械信号的传感器；（3）可溶性因子。尤其是GPCR配体，可能通过RhoGTPases和肌动蛋白动力学调节LATS1/2；（4）代谢状态。如细胞能量....

图3.1，抑制Hippo信号通路促进hTERT转录调控

24图3.1，抑制Hippo信号通路促进hTERT转录调控。（A）用FBS和LPA处理血清饥饿12h的293A，免疫荧光观察YAP的入核情况，荧光定量PCR检测hTERTmRNA的表达水平。（B）293A血清饥饿12h，10%FBS处理0.5....

图3.2，YAP可以调控hTERT的表达

26图3.2，YAP可以调控hTERT的表达。（A-D）在HeLa、MCF7、293T细胞中过表达野生型YAP，持续激活型YAP-5SA，用q-PCR和免疫印迹方法检测hTERTmRNA与蛋白表达水平。（E，F）在293ALATS1/2KO的细胞系，....

本文编号：4025675