SIRT1抑制PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞葡萄糖摄取和代谢

发布时间：2017-06-05 06:20

  本文关键词：SIRT1抑制PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞葡萄糖摄取和代谢，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:血管平滑肌细胞(VSMCs)中葡萄糖摄取和代谢的异常增加能导致动脉粥样硬化等多种血管疾病,已有研究表明PDGF-BB通过诱导葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的膜转位,促进葡萄糖的摄取和代谢。去乙酰化酶SIRT1能影响胰腺β细胞、脂肪细胞和肝细胞等葡萄糖的摄取和代谢,而在VSMCs中SIRT1与葡萄糖摄取和代谢的关系尚不清楚,本实验利用SIRT1的激动剂和抑制剂分别处理VSMCs,以探讨SIRT1与葡萄糖摄取及代谢的相关性。方法与结果:1 PDGF-BB刺激VSMCs的GLUT4膜转位PDGF-BB(20 ng/m L)刺激VSMCs 0、5、15、30 min后,用Western blotting及细胞免疫荧光染色检测GLUT4的亚细胞分布。结果显示,与对照组相比,在PDGF-BB刺激的VSMCs中,GLUT4膜转位显著增强,并在15 min达到高峰。2 SIRT1抑制PDGF-BB诱导的VSMCs的GLUT4膜转位培养的VSMCs经SIRT1的激动剂白藜芦醇(50μM)和SIRT1抑制剂EX-527(10μM)预孵育4 h后,PDGF-BB(20 ng/m L)刺激15 min。细胞免疫荧光结果显示,与对照组相比,白藜芦醇预孵育组GLUT4膜转位减弱,而EX-527预孵育组GLUT4膜转位增强。3 PDGF-BB刺激VSMCs葡萄糖摄取PDGF-BB(20 ng/m L)和荧光标记葡萄糖类似物2-N[7-硝基苯-2-乙二酸,34羟氨基]-2-脱氧葡萄糖(2-NBDG,100μM)共同刺激VSMCs 0、5、10、20、30、60 min,流式细胞术检测VSMCs对2-NBDG的摄取。结果显示,PDGF-BB诱导的VSMCs葡萄糖摄取量呈时间依赖性增强,并在20 min时达到高峰。4 SIRT1抑制PDGF-BB诱导的VSMCs葡萄糖摄取培养的VSMCs经SIRT1的激动剂白藜芦醇和SIRT1(50μM)抑制剂EX-527(10μM)预孵育4 h后,PDGF-BB(20 ng/m L)刺激20 min,用流式细胞术检测VSMCs对2-NBDG摄取。结果显示,与对照组相比,白藜芦醇预孵育组葡萄糖摄取减弱,而EX-527预孵育组葡萄糖摄取增强。5 PDGF-BB增强VSMCs己糖激酶活性PDGF-BB(20 ng/m L)刺激VSMCs 0、5、10、15、30、45、60 min后,检测VSMCs己糖激酶活性。结果显示,VSMCs己糖激酶活性与PDGF-BB刺激呈时间依赖性增强,30 min达到高峰。6 SIRT1抑制PDGF-BB诱导的VSMCs己糖激酶活性增强培养的VSMCs经SIRT1的激动剂白藜芦醇(50μM)和SIRT1抑制剂EX-527(10μM)预孵育4 h后,PDGF-BB(20 ng/m L)刺激30 min后检测VSMCs己糖激酶活性,结果显示,白藜芦醇预孵育组己糖激酶活性减弱,而EX-527预孵育组己糖激酶活性增强。结论:1 PDGF-BB刺激VSMCs的GLUT4膜转位,增加葡萄糖摄取,提高己糖激酶活性。2 SIRT1抑制PDGF-BB诱导的VSMCs的GLUT4膜转位、葡萄糖摄取及代谢活性。
【关键词】：血管平滑肌细胞 PDGF-BB SIRT1 GLUT4 己糖激酶
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 英文缩写8-9
• 前言9-10
• 材料与方法10-14
• 结果14-17
• 附图17-21
• 讨论21-22
• 结论22
• 参考文献22-25
• 综述 SIRT1功能的研究进展25-43
• 参考文献34-43
• 致谢43-44
• 个人简历44-45

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