低分子量肝素凝胶对瘙痒模型小鼠的作用及药动学研究

发布时间：2017-06-07 06:05

  本文关键词：低分子量肝素凝胶对瘙痒模型小鼠的作用及药动学研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本文以低分子量肝素为研究对象,通过L9(34)正交试验设计优化处方并制备低分子量肝素凝胶,考察其经皮给药后对蛋白酶活化受体2激动剂SLIGRL-NH2引起小鼠瘙痒的作用,以及探讨经皮给药后在大鼠局部皮肤和血液中药物动力学特征。本文主要研究内容以及研究结果有以下几个方面:1.优化低分子量肝素凝胶处方选用L9(34)正交试验设计,采用体外透皮试验得到不同处方12 h累积渗透量,作为评估指标,优化低分子量肝素凝胶处方。根据正交试验结果得到最佳处方:低分子量肝素3%、月桂氮?酮5%、卡波姆1.5%,3个因素对累积渗透量的影响比较结果:低分子量肝素对凝胶透皮渗透量影响最大,其次是月桂氮?酮,最后是卡波姆。通过考察最佳处方凝胶剂体外透皮试验,结果显示其12 h累积渗透量平均为(142.23±4.60)μg,与初始9个处方结果相比其12 h累积渗透量最高。2.考察微透析技术对低分子量肝素的体内外回收率影响通过体外增量法、减量法考察流速对线性探针低分子量肝素回收率的影响及体外减量法考察低分子量肝素浓度对线性探针回收率的影响。减量法考察流速、低分子量肝素浓度对线性探针体内回收率的影响。体内、体外回收率试验结果表明,经增量法和减量法测定的线性探针回收率基本一致;灌流速度越小,低分子量肝素回收率越大,且线性探针的回收率不受低分子量肝素浓度影响。减量法考察线性探针体内回收率稳定性,当线性探针的灌流速度为2μL·min-1时,8小时回收率的变化基本保持稳定,线性探针平均回收率为(60.42±3.78)%。本研究结果提示,微透析技术可以用于低分子量肝素凝胶经皮给药SD大鼠皮肤药动学研究。3.微透析技术探讨低分子量肝素凝胶经皮给药SD大鼠皮肤药代动力学特征SD大鼠腹部脱毛后24 h,于大鼠腹部皮下埋入线性探针,线性探针透析膜上方皮肤处给予0.2 g低分子量肝素凝胶(含600 Anti FXa IU低分子量肝素),每30min取一次透析液样品,连续采集12 h。经检测和计算得到大鼠皮肤低分子量肝素浓度—时间数据,采用非房室模型计算大鼠皮肤低分子量肝素药动学参数:低分子量肝素凝胶经皮给药后,皮下药物浓度达峰时间(Tmax)为270 min、皮下最大药物浓度(Cmax)是(4.40±0.54)IU·m L-1、T1/2为(137.04±87.98)min、AUC0-t为(911.76±330.69)IU·m L-1·min、MRT0-t为(322.67±40.94)min。4.低分子量肝素凝胶经皮给药SD大鼠血液中药代动力学特征SD大鼠腹部脱毛后24 h,经皮给予含药600 Anti FXa IU低分子量肝素凝胶,于给药前1 h、给药后1、2、4、5、6、8、9、10、12 h剪尾取血,血液经过处理后获得血浆,采用Coatest Heparin试剂盒检测大鼠血浆内低分子量肝素浓度。根据得到大鼠血液内低分子量肝素浓度—时间数据,采用非房室模型计算大鼠血液内低分子量肝素药动学参数:低分子量肝素凝胶经皮给药后,血液内药物浓度达峰时间(Tmax)为540 min、皮下最大药物浓度(Cmax)是(2.23±0.40)IU·m L-1、T1/2为(294.99±183.74)min、AUC0-t为(110.59±212.41)IU·m L-1·min、MRT0-t为(422.48±52.96)min。5.小鼠瘙痒模型验证低分子量肝素抑制瘙痒药效32只BALB/c小鼠随机分成四组:对照组、模型组、地塞米松乳膏组、低分子量肝素凝胶组,每组8只,分别在脱毛部位给予空白凝胶、空白凝胶、复方醋酸地塞米松乳膏和低分子量肝素凝胶各0.1 g,2次/日×3日,最后一次给药后2 h,除对照组小鼠用药局部皮内注射生理盐水外,其余3组小鼠皮内注射PAR-2激动剂SLIGRL-NH2,摄像机拍摄记录小鼠搔抓行为,观察并记录皮内注射后30 min内小鼠的搔抓次数。结果显示,模型组小鼠搔抓次数比对照组增多(P0.05);复方醋酸地塞米松乳膏组小鼠搔抓次数比模型组小鼠减少(P0.05);低分子量肝素凝胶组小鼠搔抓次数比模型组和地塞米松乳胶组小鼠均减少(P0.05)。由此可知,低分子量肝素凝胶能减轻PAR-2激动剂SLIGRL-NH2引起的瘙痒,在此模型中其抗瘙痒作用优于地塞米松乳膏。
【关键词】：低分子量肝素 经皮给药 蛋白酶活化受体2 瘙痒 微透析 药代动力学
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R965;R-332
【目录】：

• 摘要7-9
• Abstract9-12
• 前言12-15
• 第一部分 低分子量肝素凝胶处方优化及体外透皮特征研究15-22
• 一、实验材料15
• （一）试剂15
• （二）仪器15
• （三）动物15
• 二、实验方法15-18
• （一）建立PBS中LMWH含量测定方法15-17
• （二）LMWH凝胶制备方法17
• （三）正交试验设计与验证试验17-18
• （四）LMWH凝胶体外经皮渗透实验18
• （五）LMWH凝胶最佳处方体外经皮渗透验证试验18
• （六）数据分析18
• 三、实验结果18-21
• （一）正交试验设计与结果18-21
• （二）LMWH凝胶最佳处方体外经皮渗透验证试验结果21
• 四、讨论21-22
• 第二部分 低分子量肝素凝胶经皮给药后大鼠皮肤药动学研究22-33
• 一、实验材料22
• （一）试剂22
• （二）仪器22
• （三）动物22
• 二、实验方法22-26
• （一）建立PBS中LMWH含量测定方法22-24
• （二）微透析体外LMWH回收率考察24-25
• （三）微透析体内LMWH回收率考察25-26
• （四）微透析LMWH凝胶给药方案26
• （五）数据分析26
• 三、实验结果26-31
• （一）线性探针体外LMWH回收率实验26-28
• （二）线性探针体内LMWH回收率实验28-29
• （三）线性探针体内LMWH回收率的稳定性29-30
• （四）LMWH凝胶经皮给药后大鼠皮肤LMWH药时曲线30
• （五）大鼠LMWH凝胶经皮给药后皮肤药动学参数30-31
• 四、讨论31-33
• 第三部分 低分子量肝素凝胶经皮给药后大鼠血液药动学研究33-39
• 一、实验材料33
• （一）试剂33
• （二）仪器33
• （三）动物33
• 二、实验方法33-36
• （一）实验方法33-34
• （二）测定原理34
• （三）系列LMWH标准溶液的配制34-35
• （四）样品处理35
• （五）测定步骤35
• （六）数据分析35-36
• 三、实验结果36-38
• （一）建立血浆中LMWH含量检测方法36-37
• （二）LMWH凝胶经皮给药后大鼠血液中LMWH药时曲线37
• （三）大鼠经皮给药后血液LMWH药动学参数37-38
• 四、讨论38-39
• 第四部分 低分子量肝素凝胶对瘙痒模型小鼠的作用39-43
• 一、实验材料39
• （一）试剂39
• （二）仪器39
• （三）动物39
• 二、实验方法39-40
• （一）构建瘙痒小鼠模型与分组、给药39-40
• （二）瘙痒行为学分析40
• （三）统计学处理40
• 三、LMWH凝胶对瘙痒模型小鼠搔抓行为的影响40-42
• 四、讨论42-43
• 全文总结43-44
• 参考文献44-47
• 综述 蛋白酶活化受体2生物学效应及其相关靶点药物研究进展47-61
• 参考文献56-61
• 在读期间科研成果61-62
• 致谢62

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 朱爱堂,丁桂莲;肝素凝胶亲和纯化重组碱性成纤维细胞生长因子时凝胶使用次数研究[J];中国生化药物杂志;2001年05期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 王光毅;田建广;夏照帆;;肝素凝胶治疗烧伤深Ⅱ度创面的疗效观察[A];全国烧伤创面处理、感染专题研讨会论文汇编[C];2004年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 李超;低分子量肝素凝胶对瘙痒模型小鼠的作用及药动学研究[D];第二军医大学;2016年

  本文关键词：低分子量肝素凝胶对瘙痒模型小鼠的作用及药动学研究，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：428309