大鼠动脉粥样硬化模型TLR6的表达及瑞舒伐他汀干预后的影响研究

发布时间：2017-06-09 20:13

  本文关键词：大鼠动脉粥样硬化模型TLR6的表达及瑞舒伐他汀干预后的影响研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本实验采用SD(Sprague dawley)大鼠动脉粥样硬化模型,应用HE染色、免疫组化蛋白定量、RT-PCR检测等方法,观察动脉粥样硬化大鼠胸主动脉中TLR6(Toll-like receptors6,TLR6)的表达情况。初步研究并探讨瑞舒伐他汀对TLR6的表达变化的作用和对动脉粥样硬化的影响。方法:本实验共选择36只雄性SD大鼠,平均6-8周龄,体重约180g-200g,先使用普通饲料顺应性喂养7天,然后采取随机抽签的方法将36只大鼠分为两组,分别为:对照组(n=12)和实验组(n=24)。实验组予以高脂饲料喂养,然后在其基础上予以维生素D3肌注+尼古丁灌胃,第4周后,将实验组24只大鼠再随机分为模型组(n=12)和药物组(n=12),模型组和药物组大鼠继续每日使用高脂饲料喂养。同时,在高脂饲料饲喂的基础上,模型组加用1ml生理盐水对大鼠进行灌胃,连续4周,药物组则给予同等剂量的瑞舒伐他汀(5mg/kg/d)对大鼠进行灌胃,连续4周。实验末测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。采用HE染色观察大鼠胸主动脉血管的组织形态学特点,采用免疫组化技术分析大鼠胸主动脉TLR6蛋白的表达情况,采用荧光定量PCR技术检测胸主动脉TLR6 mRNA的定量表达水平。结果:1、血脂结果:模型组及药物组的tc水平、ldl-c水平与对照组相比均显著上升,其差异具有统计学意义(p0.05),而药物组较之模型组,其tc水平、ldl-c水平明显降低(p0.05)。三组之间的tg及hdl-c水平无显著性差异(p0.05)。2.病理形态学结果:对照组可见胸主动脉血管各层结构排列正常,管壁比较完整,管壁内膜光滑,内皮细胞排列均匀而整齐。模型组可见胸主动脉血管组织各层结构排列不规则,管壁内膜不完整,可见其明显增厚,同时在管壁内有大量增生的平滑肌细胞,脂质斑块弥漫,可见大量的泡沫细胞聚集,并有大量脂质沉积、钙化及炎症细胞浸润。药物组可见胸主动脉血管组织各层结构排列欠规则,管壁内膜欠完整,可见其稍增厚,同时在管壁内有少量平滑肌细胞增生及炎性细胞浸润,可见少量的泡沫细胞聚集,血管壁脂质沉积和钙化较模型组减轻。3.免疫组织化学结果:tlr6蛋白在大鼠胸主动脉中均可见表达,模型组及药物组的tlr6蛋白表达水平与对照组相比均升高(p0.05),而药物组较之模型组,其tlr6蛋白表达水平降低(p0.05)。4.荧光定量pcr检测结果:模型组与对照组及药物组相比,其胸主动脉tlr6mrna表达水平较高(p0.05),而药物组较之模型组,其tlr6mrna表达水平降低(p0.05)。结论:1.大鼠动脉粥样硬化模型tlr6的表达水平升高。2.瑞舒伐他汀可能通过下调TLR6的表达从而改善动脉粥样硬化。
【关键词】：动脉粥样硬化 TLR6 瑞舒伐他汀
【学位授予单位】：湖南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R543.5;R-332
【目录】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-12
• 第一章 引言12-15
• 第二章 材料和方法15-23
• 2.1 实验动物15
• 2.2 主要药品和试剂15-16
• 2.3 主要实验仪器16
• 2.4 实验动物分组及模型制备16-17
• 2.5 生化指标检测17
• 2.6 取材及组织石蜡切片制备17-18
• 2.7 HE染色18
• 2.8 免疫组织化学染色（ABC法）18-19
• 2.9 图像处理及组织病理学的测量19-20
• 2.10 RT-PCR检测TLR6 mRNA20-22
• 2.11 统计分析22-23
• 第三章 结果23-30
• 3.1 实验动物的一般情况23
• 3.2 各组血脂情况23-24
• 3.3 HE染色24-25
• 3.4 免疫组织化学染色25-26
• 3.5 RT-PCR结果分析26-30
• 第四章 讨论30-35
• 第五章 结论35-36
• 参考文献36-40
• 综述40-52
• 参考文献46-52
• 英文缩写词表52-54
• 在读期间发表的主要学术论文及参与课题54-56
• 致谢56

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本文编号：436579