结核分枝杆菌H37Rv菌株Hsp16.3基因缺失突变株的构建与鉴定

发布时间：2017-07-16 12:22

  本文关键词：结核分枝杆菌H37Rv菌株Hsp16.3基因缺失突变株的构建与鉴定

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【摘要】：目的构建及鉴定结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16.3基因缺失突变株。方法体外培养结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株,并提取基因组DNA,扩增Hsp16.3基因两侧序列,分别插入到pKO质粒载体预定位点中,构建Hsp16.3基因置换型打靶载体,电转入结核分枝杆菌H37Rv菌株内,并与其基因组中的Hsp16.3基因同源交换,筛选出Hsp16.3基因缺失突变株。结果通过卡那霉素筛选和蔗糖反筛选及PCR鉴定,并在含有潮霉素培养基上不能生长的菌株为Hsp16.3基因缺失突变株。结论成功构建出结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16.3基因缺失突变株。
【作者单位】： 重庆市永川区人民医院;石河子大学
【关键词】： 基因敲除 Hsp. 结核分枝杆菌 HRv
【基金】：国家自然科学基金(No.30960355) 石河子大学科学技术研究发展计划“自然科学与计划创新”重点项目(No.ZRKX2010ZD01)~~
【分类号】：R378
【正文快照】： 结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tu-berculosis,MTB)引起的世界性传染病,我国的结核病疫情依然十分严重,肺结核病的发病和死亡人数 始终排在法定报告传染病的首位。结核分枝杆菌感染人体后主要寄生在宿主巨噬细胞内,结核分枝杆菌小分子热休克蛋白(small heat shock pr

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