CIITA基因沉默对小鼠骨髓来源的树突状细胞表型及功能的影响

发布时间：2017-07-31 11:19

  本文关键词：CIITA基因沉默对小鼠骨髓来源的树突状细胞表型及功能的影响

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【摘要】：研究MHCII类反式作用因子(CIITA)基因干扰对小鼠骨髓来源的树突状细胞(dendritic cells,DC)的表型及功能的影响。体外培养小鼠骨髓来源DC,将CIITA siRNA通过脂质体法转染DC,实时荧光定量PCR(qPCR)、western Blot及流式细胞术(FCM)检测转染前后CIITA mRNA、蛋白表达量及MHC-II分子表达;混合淋巴细胞反应检测干扰CIITA基因后的DC对异基因淋巴细胞增殖能力的影响,ELISA检测共培养上清中细胞因子IL-4、IFN-γ和IL-10的表达水平。qPCR结果显示,DC转染CIITA siRNA后,CIITA mRNA与control siRNA组相比明显降低;western blot结果显示转染CIITA siRNA后,DC中的CIITA的蛋白表达量降低,FCM结果显示,转染的DC表面的MHC-II分子表达降低,同时CD40、CD80/CD86分子表达也有一定的降低;转染CIITA siRNA的DC,其刺激异基因淋巴细胞的增殖能力与对照组DC相比显著减弱,细胞产生IL-4和IL-10的水平提高而IFN-γ的水平降低。表明CIITA siRNA通过抑制DC的CIITA基因表达来降低MHC-II及共刺激分子CD40、CD80/CD86分子水平,减弱DC将抗原提呈给T细胞的能力,从而使免疫反应处于低激活状态。
【作者单位】： 南通大学医学院免疫学系;南通大学附属医院;
【关键词】： CIITA siRNA 树突状细胞
【基金】：江苏高校优势学科建设工程资助(PAPD) 国家自然科学基金(30800998)
【分类号】：R392
【正文快照】： 树突状细胞(dendritic cell,DC)介导双向免疫调节,即可促发免疫应答,又可介导免疫耐受的发生,在免疫系统中起着至关重要的作用。成熟的树突状细胞(mature dendritic cell,mDC),高表达主要组织的相容性复合物II(major histocompati-bility complex-II,MHC-II)类分子、共刺激分

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本文编号：598890