Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎肠神经系统中的表达及意义

发布时间：2017-08-25 16:11

  本文关键词：Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎肠神经系统中的表达及意义

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【摘要】：研究背景及研究目的：肠道神经系统(Enteric Nervous System, ENS)相关的一系列疾病一直以来都是医学界的难题,它们的影响因素众多,表现形式各样,病因往往都不是非常明确,而且,近些年ENS疾病发病率呈现出增长趋势,即使有些肠道神经系统相关疾病可以通过外科手术的方式得到治疗,但它们的术后并发症或术后恢复情况仍会受到许多不明病因的影响,这些不被详知的病因一直以来都是我们研究的对象。.Neuroligin1基因广泛存在于人类和其它哺乳动物的体内,且在ENS内广泛表达,同时也发挥着重要的作用,我们此次科研的目的就是研究Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎的ENS中的表达情况,探讨Neuroligin1基因的表达与ENS和ENS疾病之间的关系。实验方法：分别取Wistar大鼠的胚胎第16(E16)、18(E18)、20(E20)天和出生第一天(B1)的胚鼠肠管标本各30只,分别通过免疫荧光两重标记的染色技术、Western blot的技术、多聚核苷酸链式反应(实时荧光定量的)的实验技术(Real-time Quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)、酶联免疫吸附的实验技术(ELISA)、免疫组织化学的实验技术(immunohi stochemi stry)等实验方法,研究Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎ENS各个发育时期中的表达情况。实验结果：在Wistar大鼠E16、E18、E20和B1四个ENS发育时期中：免疫荧光两重标记的染色技术显示Neuroligin1基因阳性面积的平均光密度值分别为E16 (0.046±0.031), E18(0.146±0.033), E20(0.233±0.034), Bl (0.345± 0.344),且四组之间的差别经统计软件处理证实有意义(F=441.614,P=-0.000,P0.05),同时在组组相比的过程中,平均蛋白浓度均有差别且经统计软件处理证实有意义(比较结果都符合P=-0.000,P0.05);Western blot显示Neuroligin1基因的平均蛋白表达量分别为E16(0.053±0.025)、E18(0.146±0.024)、E20(0.249±0.034)、B1(0.533±0.049),且四组之间的差别经统计软件处理证实有意义(F=1070.296,P=0.000,P0.05),同时在组组相比的过程中,平均蛋白浓度均有差别且经统计软件处理证实有意义(比较结果都符合p=0.000,p0.05);qRT-PCR显示Neuroligin1基因的mRNA目对平均浓度分别为E16(2.543±1.294)、E18(4.637±1.830)、E20(6.814±1.552)、B1(8.345±1.364),且四组之间的差别经统计软件处理证实有意义(F=81.440,P=-0.000,P0.05),同时在组组相比的过程中,平均mRNA浓度均有差别且经统计软件处理证实有意义(比较结果都符合p=0.000,p0.05);ELISA显示Neuroligin1基因表达的蛋白平均浓度分别为E16(0.069±0.061)、E18(0.153±0.102)、 E20(1.087±0.093)、B1(1.678±0.085),且四组之间的差别经统计软件处理证实有意义(F=2396.068,p=0.000,K0.05),同时在组组相比的过程中,平均蛋白浓度均有差别且经统计软件处理证实有意义(比较结果都符合p=O.000,p0.05)；免疫组织化学技术显示Neuroligin1基因表达的蛋白分别为E16(±～+)、 E18(+～++)、E20(++～+++)、B1 (+++～++++),表达量的大小顺序为：E16E18E20B1；免疫荧光两重标记的染色技术、Western blot.qRT-PCR.ELISA和免疫组织化学技术中Neuroligin1基因的表达趋势彼此一致。实验结论： 在E16到B1这段时期内,随着Wistar大鼠ENS的发育,Neuroligin1在ENS的表达呈递增趋势；Neuroligin1在ENS的异常表达发生越早,相关疾病可能就越严重；Neuroligin1基因相关的ENS疾病可能是先天发育异常。
【关键词】：Neuroligin1 大鼠胚胎 肠神经系统疾病 表达
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R321
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 英文缩略词表10-11
• 第一章 前言11-13
• 第二章 材料与方法13-30
• 第三章 实验结果30-31
• 第四章 讨论31-33
• 第五章 结论33
• 第六章 本实验研究的不足之处33-34
• 第七章 对继续研究的思考34-35
• 附图及附表35-46
• 参考文献46-51
• 致谢51-52
• 攻读硕士学位期间发表的论文52-53
• 附件53

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本文编号：737387