应用SOEing方法构建SOD1-G93A的真核表达载体

发布时间：2017-08-26 01:51

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【摘要】：目的构建铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide dismutase,SOD1)-G93A的真核表达载体。方法应用重叠区扩增基因拼接法(SOEing)分别扩增前段M1基因与包含突变位点的后段M2基因,然后将2段基因拼接起来,得到SOD1-G93A基因,并克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体上。结果成功扩增出SOD1-G93A基因,测序结果与GenBank完全一致;对重组质粒SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)进行双酶切鉴定,测序结果与预期完全一致。结论成功构建了SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)真核表达载体。
【作者单位】： 山东省临沂市人民医院神经病学实验室;山东省临沂市人民医院神经内科;
【关键词】： 超氧化物歧化酶 点突变 质粒 DNA 重组 肌萎缩侧索硬化 重叠区扩增基因拼接法
【基金】：山东省自然科学基金资助项目(项目编号:ZR2010HM041) 山东省博士后创新项目专项资金(项目编号:201102004)
【分类号】：R341
【正文快照】： 铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide dismutase,SOD1)主要存在于真核细胞的细胞质中,是一种重要的氧自由基清除剂,能使超氧阴离子自由基歧化,生成过氧化氢(H2O2)和O2,而H2O2则被过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化氢酶清除,从而保护机体免受损伤[1]。当前国际上已发现SOD1基因有15

【参考文献】

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本文编号：738949