人副流感病毒3型HN糖蛋白N-糖链的功能研究

发布时间：2017-08-30 12:00

  本文关键词：人副流感病毒3型HN糖蛋白N-糖链的功能研究

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【摘要】：为了研究人副流感病毒3型(hPIV3)HN糖蛋白N-糖链的功能,采用基因定点突变技术构建糖基化位点突变体,然后检测各突变株的蛋白电泳速率、细胞表面表达量、受体结合活性、神经氨酸酶活性和促细胞融合活性。HN分子的G1、G2、G3和G4 4个糖基化位点分别和联合突变后发现G1、G2和G4及其联合突变株(G12、G14、G24和G124)电泳速率加快,而G3突变株电泳速率没有变化。各突变株的表达效率,神经氨酸酶活性与野毒株相比差别无统计学意义(P0.05),但受体结合活性和促细胞融合活性均有不同程度的降低(P0.05)。G1、G2和G4位点突变后受体结合活性分别为突变前的83.94%、76.45%和55.32%,而促细胞融合活性降为突变前的80.84%、77.83%和64.16%。联合突变株G12、G14、G24和G124血吸附活性进一步降低,为突变前的33.07%、20.67%、19.96%和15.11%,促细胞融合活性进一步降低为突变前的46.36%、12.04%、13.43%和4.05%。结果表明:hPIV3HN糖蛋白的糖链对HN糖蛋白的受体结合活性和促细胞融合活性有重要影响,推断糖链的丢失可能会引起HN糖蛋白头部结构(受体结合活性位点所在区域)或者方向的改变或者无法与宿主细胞膜表面的凝集素受体(一种与N-糖链结合的受体)结合,进而导致受体结合活性和促细胞融合活性的降低。
【作者单位】： 山东大学公共卫生学院病毒学研究室;山东大学医学院实验核医学研究所;山东大学实验畸形学教育部重点实验室;山东省疾病预防控制中心;山东大学医学院生化与分子生物学研究所;
【关键词】： 副流感病毒型 人 HN蛋白质 细胞融合 血细胞吸附 神经氨酸酶
【基金】：国家自然科学基金(30970142和81271806) 山东大学创新团队资助项目 山东省自然科学基金(2009ZRB019VW) 中国博士后科学基金(20090461219)
【分类号】：R373
【正文快照】： 人副流感病毒3型(Human parainfluenza virustype 3,hPIV3)属于副粘病毒科副粘病毒属,是引起婴幼儿下呼吸道感染的重要病原[1],可造成反复感染的下呼吸道疾病[2]。hPIV3包膜上和感染的宿主细胞表面镶嵌有两种糖蛋白,即血凝素-神经氨酸酶(Hemagglutinin-neuraminidase,HN)和融

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本文编号：759158