大鼠比目鱼肌梭内肌纤维的分离方法

发布时间：2017-09-02 03:03

  本文关键词：大鼠比目鱼肌梭内肌纤维的分离方法

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【摘要】：梭囊的存在限制了人们对肌梭功能及其机制的深入研究,本研究旨在建立将梭内肌纤维从梭囊中分离出来的方法。应用混合酶液消化的方法,分离大鼠比目鱼肌的梭内肌纤维,使用不同的培养基溶液进行培养,用台盼蓝染色法检测细胞活性,用膜片钳技术检测静息膜电位。结果显示,氨基酸-生理盐溶液中梭内肌纤维几乎全部坏死,DMEM培养基虽能较好地维持细胞状态,但是对CO2含量要求较高,而Leiboviz’s 15(L-15)培养基能够维持梭内肌纤维的正常形态和功能达1～2h;和常规处理过的盖玻片相比,用明胶-多聚赖氨酸-血清处理过的盖玻片上梭内肌纤维更易贴壁;分离出的梭内肌纤维静息膜电位为(45.3±5.1)mV,显示纤维的功能状态良好,能够满足电生理实验的要求。本研究为进一步研究梭内肌纤维的功能及其机制奠定了良好的方法学基础。
【作者单位】： 湖北文理学院医学院机能学部;西安交通大学医学院生理教研室;南昆士兰大学生物和物理科学系;
【关键词】： 肌梭 梭内肌纤维 静息膜电位
【基金】：supported by the National Natural Science Foundation of China(No.30901583) the Natural Science Foundation of Hubei Province of China(No.2012FFC05601)
【分类号】：R338
【正文快照】： 肌梭是骨骼肌中的重要感受器,其表面由结缔组织形成被囊,内含有3~16条较细的梭内肌纤维。长期以来,许多学者利用电生理学、生物化学、组织化学等多种方法,对肌梭的发育、形态结构及其462生理学报Acta Physiologica Sinica,August25,2013,65(4):461 465种酶溶于生理盐溶液或

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本文编号：775976