小鼠抗人CD52功能性抗体的制备与鉴定

发布时间：2017-09-04 12:06

  本文关键词：小鼠抗人CD52功能性抗体的制备与鉴定

  更多相关文章： CD抗体 真核表达载体 稳定转染细胞 抗体制备

【摘要】：目的鼠抗人CD52抗血清的制备与功能鉴定。方法由人Hut-78细胞提取细胞总RNA,运用RT-PCR方法扩增CD52基因,定向克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),用脂质体转染法转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、FACS、免疫组织化学技术检测目的蛋白的表达。用CD52合成肽免疫小鼠,通过间接ELISA和流式细胞术分析抗血清,用MTS实验鉴定抗体对白血病LCL细胞系的增殖抑制作用。结果建立了稳定转染的CHO细胞系。鉴定出有高效价抗体存在。MTS实验检测免疫血清有抑制LCL细胞生长作用。结论功能性抗体制备成功并建立了稳定转染CD52的CHO细胞系。
【作者单位】： 北京协和医学院中国医学科学院血液学研究所血液病医院;内蒙古科技大学包头医学院;协和干细胞基因工程有限公司;
【关键词】： CD抗体 真核表达载体 稳定转染细胞 抗体制备
【基金】：天津市科技创新专项资金项目(08FDZDSH03000)
【分类号】：R392.11
【正文快照】： CD52抗原是一个只有十二个氨基酸残基(GQNDTSQTSSPS)的糖基磷脂酰肌醇(glycosyl phos-phatidyl inositol,GPI)锚定糖蛋白,其C末端通过与GPI连接而固定在细胞膜上,N末端在3位天冬酰氨上连接有一个复杂的富含阴离子的糖基,在其四角岩藻糖基化的甘露糖核心上有几个唾液酸化的多

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 郑树涛;刘忠渊;张富春;;小分子肽制备抗体方法的研究进展[J];细胞与分子免疫学杂志;2008年03期

2 郑树涛;刘忠渊;王慧;窦君;张富春;;新疆家蚕抗菌肽的抗体制备及鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2008年08期

3 陈慧红,余新炳,吴忠道,陆家海,徐劲;恶性疟原虫FCC1/HN株CTP基因真核表达载体的构建(英文)[J];中国寄生虫病防治杂志;2002年01期

4 邓兴力;杨智勇;冯忠堂;董坚;王廷华;徐丹;;神经营养素3基因克隆及其真核表达载体的构建[J];华中医学杂志;2008年02期

5 李斌;梁亮;甄海宁;林伟;晁晓东;董文鹏;李娟;章翔;;人源性Notch 1胞内段真核表达载体的构建及鉴定[J];中华神经外科疾病研究杂志;2008年01期

6 周军;李建明;杨发达;柳玉红;丁彦青;;CDH22基因克隆及其真核表达载体的构建与表达[J];中国热带医学;2008年07期

7 李宝群;梅爱敏;左_e珍;;维生素D受体野生型及FokⅠ突变型真核表达载体的构建[J];实用医学杂志;2011年07期

8 顾广玉,王文亮,黄高升;MTS1和反义MTS1真核表达载体的构建与鉴定[J];第二军医大学学报;1998年02期

9 张宏,肖文华,梁后杰;正反义人DNA(5-胞嘧啶)甲基转移酶基因片段真核表达载体的构建[J];癌症;2001年11期

10 程蓓,叶大风,谢幸,陈怀增,吕卫国;人白细胞介素7基因克隆及其真核表达载体的构建[J];浙江大学学报(医学版);2002年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 张晓丹;吕茂民;吴健敏;章金刚;;猪内源性反转录病毒衣壳蛋白基因真核表达载体的构建与单克隆抗体制备[A];中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2005年

2 尹郸丹;梁英民;韩骅;侯丽宏;王耀春;胡兴斌;张萍;康志杰;时宏伟;;RBP-J与KyoT2真核表达载体的构建与鉴定[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

3 郭鹏;闫承慧;郭亮;康建;韩雅玲;;小鼠E1A激活基因阻遏子RNA干扰表达载体的构建及鉴定[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年

4 杨英;刘树铮;;pNEgr-mIL-12真核表达载体的构建及其在体外和体内生物学活性的检测[A];中华医学会放射医学与防护学分会第三次全国中青年学术交流会论文汇编[C];2001年

5 王郡甫;许晓群;张彩;张建华;高春义;;人白细胞介素21真核表达载体的构建及其在NK92细胞中的表达[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年

6 郭鹏;闫承慧;郭亮;康建;韩雅玲;;小鼠E1A激活基因阻遏子RNA干扰表达载体的构建及鉴定[A];中华医学会心血管病学分会第十次全国心血管病学术会议汇编[C];2008年

7 蔺丽慧;崔玉宝;李莉;;Fcγ-Der f2载体构建及融合蛋白表达[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年

8 彭旭;谭江琳;袁顺宗;马兵;贺伟峰;黄正根;程文广;王晓娟;甘成军;胡婕;杨世伟;杨俊杰;陈希炜;胡晓红;张小容;罗高兴;吴军;;HT036是纤维化相关基因P311的相互作用蛋白[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年

9 高蕾;陈幸华;张曦;彭贤贵;孔佩艳;刘林;刘红;张怡;刘耀;;VCAM-1基因的克隆及VCAM-1-pcDNA3．1(+)真核表达载体的构建[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年

10 胡敬海;王春喜;;抑癌基因TIP30真核表达载体的构建[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 ;1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及在HepG2细胞中的表达[N];中国医药报;2003年

2 胡德荣;肝癌疫苗进入二期临床[N];健康报;2004年

3 张中桥;反义Cortactin基因能抑制肝癌细胞转移[N];中国医药报;2006年

4 张中桥;Survivin是脑胶质瘤基因治疗的良好靶点[N];中国医药报;2006年

5 吴一福;首次成功分离出HPA全长编码基因[N];中国医药报;2005年

6 吴一福;四军医大成功建立HCV多表位基因P815细胞系[N];中国医药报;2006年

7 张中桥;西京医院建立稳定表达MAGE-n细胞系[N];中国医药报;2006年

8 许可臻;上海生物医药重大突破注射疫苗可杀灭肝癌细胞[N];医药导报;2004年

9 文建平;生物医药外包相中中国[N];医药经济报;2004年

10 记者　姜云飞;海归博士欲建抗体“世界工厂”[N];大连日报;2006年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 郭凯文;ASAP3对人肝癌细胞侵袭转移能力的影响[D];华中科技大学;2011年

2 蔺会云;一条新的转移相关基因mag-1的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年

3 廖婵;抗人CD45亚类新单抗ZCH-6-3A4识别抗原表位的研究[D];浙江大学;2011年

4 窦春青;人FXYD6蛋白多克隆抗体制备及FXYD6与胆管癌细胞增殖、侵袭关系研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2007年

5 孙宇辉;人Ang-2基因真核表达载体的构建及对宫颈癌肿瘤血管形成的影响[D];吉林大学;2004年

6 危少华;人重组IL-24基因治疗乳腺癌的实验研究[D];苏州大学;2005年

7 张丽君;bFGF基因转染成骨细胞的生物学性质及成骨研究[D];华南理工大学;2003年

8 李健;miR-155真核表达载体的构建及其在胰腺癌中功能的初步研究[D];中国协和医科大学;2008年

9 许贞书;人血液血管细胞生成素对骨髓基质细胞生物学作用的实验研究[D];福建医科大学;2005年

10 程绍辉;免疫分子的锚定修饰及其抑瘤效果的初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 宋晖;KAI1基因真核表达载体的构建及其对卵巢癌细胞侵袭抑制作用的体外研究[D];第四军医大学;2004年

2 左国伟;人乳头瘤病毒11型E6基因的克隆、真核表达及其功能的初步研究[D];重庆医科大学;2005年

3 涂亦娴;猪瘟病毒E2基因的克隆及其DNA疫苗免疫效果的研究[D];新疆大学;2005年

4 周丹;猪细小病毒SC1株VP2基因表达载体的构建及其表达的研究[D];四川农业大学;2005年

5 李一冬;hTERT真核表达载体的构建与表达[D];郑州大学;2005年

6 李强;重症肌无力抗乙酰胆碱受体单链抗体A7基因真核表达载体的构建[D];延边大学;2006年

7 王青;新城疫病毒F基因在真核及原核表达系统中的表达[D];西北农林科技大学;2007年

8 许子志;乳腺癌细胞Id1 miRNA真核表达载体构建转染及对MMP9的影响[D];福建医科大学;2009年

9 张惠菊;人自身抗原U1RNP-70K的酵母重组表达及其抗体检测斑点免疫金渗滤法的建立[D];福建医科大学;2009年

10 卢春生;人骨形成蛋白2和7成熟肽编码区基因克隆和真核表达载体的构建[D];广州医学院;2009年

，

本文编号：791432