小鼠源性ABIN1蛋白的抗体制备及功能验证

发布时间：2017-09-04 13:40

  本文关键词：小鼠源性ABIN1蛋白的抗体制备及功能验证

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【摘要】：目的制备小鼠源性A20结合核因子κB活化抑制蛋白1(A20 binding inhibitor of NF-κB activation 1,mABIN1)的多克隆抗体并进行功能验证,利用该抗血清对大鼠脑区ABIN1的分布进行验证。方法利用mABIN1片段与钥孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)耦联得到的肽段为免疫原,免疫新西兰大耳白兔3次,共35 d,获得抗血清,分别用ELISA、蛋白免疫(Western)印迹和免疫组织荧光化学法对抗体的特异性进行验证;使用上述验证所得的特异性抗血清,通过Western印迹检测ABIN1在大鼠各脑区的分布;对所得到的特异性抗血清进行纯化。Western印迹证明,纯化后的抗体杂带较纯化前明显降低,但效价也有所下降。结果与结论成功制备了兔抗小鼠ABIN1抗血清并对抗血清进行纯化,经该抗血清首次验证ABIN1在大鼠嗅球、皮质、海马、纹状体、伏隔核、丘脑、下丘脑、小脑、脑干及脊髓等中枢神经系统不同部位均有广泛分布,为在动物体内进行ABIN1生物学功能研究提供了有利工具。
【作者单位】： 军事医学科学院毒物药物研究所;
【关键词】： 小鼠源性ABIN 钥孔血蓝蛋白 耦联肽 抗体 纯化
【基金】：北京市自然科学基金资助项目(7092078) 国家自然科学青年基金资助项目(30901799)
【分类号】：R392.11
【正文快照】： A20结合核因子κB活化抑制蛋白1(A20 bind-ing inhibitor of NF-κB activation 1,ABIN1)是近年来研究发现的一个新泛素结合蛋白,因其能与锌指结构蛋白A20结合并抑制肿瘤坏死因子(tumor necro-sis factor,TNF)诱导的核因子(NF)-κB的活性而得名[1]。近年研究表明ABIN1不仅在NF

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 范宏光;刘莹;杨晨辉;张祥建;;锌指蛋白A20及ABINs对NF-κB的负反馈调节[J];脑与神经疾病杂志;2008年04期

2 甘丽晶;刘晓波;胡质毅;;抗体分离纯化技术研究进展[J];检验医学与临床;2013年04期

3 王萧;周培岚;李玉蕾;宫泽辉;;A20结合核因子抑制蛋白的抗体制备及鉴定[J];军事医学;2011年02期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 喻丽;李梅章;李金荣;李晓岚;;TNIP1真核表达载体的构建及表达[J];昆明医科大学学报;2015年01期

2 祝静;邢艳;;成纤维样滑膜细胞microRNA与类风湿关节炎[J];中国免疫学杂志;2015年02期

3 张帆;朱丽花;王旭;陈少华;杨力建;吴秀丽;李，

本文编号：791872