弓形虫actin蛋白多克隆抗体的制备及纯化

发布时间：2017-09-06 09:30

  本文关键词：弓形虫actin蛋白多克隆抗体的制备及纯化

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【摘要】：目的制备弓形虫肌动蛋白(actin)的多克隆抗体并纯化。方法以弓形虫cDNA链为模板PCR扩增1 131bp actin基因,亚克隆至pET30a载体后转化入大肠埃希菌BL21中,用1mmol/L IPTG诱导表达actin-His6蛋白,采用亲和层析法纯化;取200μg纯化蛋白加等量佐剂混合,免疫SD大鼠4次,收集抗血清,用亲和纯化柱纯化。结果 PCR扩增出actin基因并成功构建actin/pET30a/BL21表达系统,获得actin-His6蛋白,制备的大鼠源性actin-His6蛋白多克隆抗体纯化后为单一蛋白抗体。结论制备并纯化了抗弓形虫actin的多克隆抗体,为弓形虫入侵机制的研究奠定了基础。
【作者单位】： 新乡医学院寄生虫学教研室;新乡医学院药理学教研室;中山大学中山医学院寄生虫学教研室;
【关键词】： 弓形虫 肌动蛋白 多克隆抗体
【基金】：河南省科技攻关计划项目(No.112102310209) 河南省教育厅自然科学研究项目(No.2012B310019) 新乡医学院博士科研启动基金项目(2010)
【分类号】：R392
【正文快照】： 弓形虫(Toxoplasma gondii)可主动入侵多种动物和人的有核细胞,导致人兽共患弓形虫病,给人类健康和畜牧业发展造成不可估量的损失。现有研究结果表明弓形虫的菱形体蛋白(rhomboids,ROMs)、肌动蛋白(actin)和微线体蛋白(microneme proteins,MICs)等多个分子参与入侵过程[1～4]

【参考文献】

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本文编号：802331