内耳注射药物建立新生鼠耳聋动物模型

发布时间：2017-09-06 12:24

  本文关键词：内耳注射药物建立新生鼠耳聋动物模型

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【摘要】：目的通过纳升级微量注射泵内耳注射给药的实验方法,建立新生鼠耳聋动物模型。方法 42只出生第二天新生鼠,分别以注射速度分组:单纯穿刺组(对照组,6只,仅穿刺耳蜗底回侧壁,不注射液体)、蒸馏水1组(H2O 20组,4只,20nl/min)、蒸馏水2组(H2O 60组,3只,60nl/min)及药物浓度分组(新霉素各组给药速度为60nl/min):新霉素1组(Neo1组,4只,1μmol/ml)、新霉素2组(Neo10组,4只,10μmol/ml)、新霉素3组Neo 50组,5只,50μmol/ml)、新霉素4组(Neo 100组,8只,100μmol/ml)及新霉素5组(Neo 50 1组,8只,50μmol/ml)。各组均采用耳蜗底回微创打孔技术,利用纳升级微量注射泵按上述各组用药、剂量及给药速度进行内耳药物注射。术后1天(Neo 50 1组)及3天(其余各组)采用基底膜免疫荧光染色观察内耳毛细胞及支持细胞的形态改变。结果术后新生鼠存活好,伤口恢复优良。耳蜗毛细胞机械性损伤与注射速度呈正相关,术后3天,H2O 20组和H2O 60组注射区域内、外毛细胞略减少,差异无统计学意义(P0.05)。毛细胞损伤与新霉素浓度呈正相关,与对照组比较,术后3天Neo1组的外毛细胞数量及Neo10、50、100组内、外毛细胞数量均明显减少(P0.05)。与H2O 60组比较,术后3天Neo50及Neo100组内、外毛细胞数量均明显减少(P0.05)。新霉素50μmol/ml注射后1天(Neo 50 1组)与3天(Neo 50组)内、外毛细胞数量差异无统计学意义(P0.05)。新霉素50μmol/ml注射后3天免疫荧光染色示支持细胞形态良好。结论利用纳升级微量注射泵给药方式注射50μmol/ml新霉素200纳升至内耳,可建立新生鼠耳聋动物模型,具有毛细胞死亡率高,致聋效果显著的优点;而支持细胞保留较好,且动物存活率高。
【作者单位】： 上海交通大学耳科学研究所内耳发育与再生实验室;上海交通大学医学院附属新华医院耳鼻咽喉头颈外科;
【关键词】： 内耳注射 耳聋模型 新霉素
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81170924)
【分类号】：R764;R-332
【正文快照】： 最新病理学研究证明耳蜗毛细胞缺失或死亡为新生儿非遗传性聋的主要原因之一[1],因此,重新生成或替代毛细胞功能为其理想的治疗策略[2]。毛细胞再生是近年来国内外研究的热点,转染毛细胞基因Atoh1[3]或抑制Notch信号通路[4]可成功将新生小鼠内耳支持细胞转化为毛细胞,但新生

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1 韩宝玲;;核糖霉素是新霉素生物合成的一个中间体[J];国外医学.药学分册;1978年04期

2 倪坤仪,唐e，

本文编号：803117