鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpA的原核表达及保守性分析
本文关键词:鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpA的原核表达及保守性分析
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【摘要】:目的:扩增鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)外膜蛋白OmpA基因,表达纯化该蛋白,为深入研究鲍曼不动杆菌亚单位蛋白疫苗奠定理论基础。方法:从ATCC19606提取OmpA基因,构建pET28a(+)-OmpA表达载体,用BL21诱导表达并纯化蛋白;选取20株临床菌株,PCR技术扩增OmpA基因,免疫印迹试验(Western blot)验证OmpA蛋白保守性。小鼠腹腔细菌攻毒后生存率观察验证疫苗保护性。结果:成功构建pET28a(+)-OmpA质粒,表达并纯化蛋白;20株鲍曼不动杆菌均扩增出OmpA基因;Western blot实验表明临床菌株OmpA蛋白表达阳性。攻毒后,免疫小鼠较对照组生存率明显增加。结论:OmpA基因和蛋白表达保守性高,具有免疫原性,是鲍曼不动杆菌疫苗良好的抗原靶点。
【作者单位】: 重庆医科大学附属第一医院检验科;
【关键词】: 鲍曼不动杆菌 原核表达 OmpA 保守性分析 亚单位疫苗
【基金】:国家自然科学基金(No.81000711) 国家临床重点专科建设项目经费财社[2010]305号资助
【分类号】:R378
【正文快照】: 鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,AB)为非发酵革兰阴性杆菌,广泛存在于自然界,属于条件致病菌。该菌是唯一能在人类皮肤表面生存的革兰阴性杆菌,对湿热、紫外线、化学消毒剂和外界环境有较强抵抗力。它是院内感染的重要病原菌之一,其耐药率也呈逐年上升趋势[1-3],甚至
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