肺表面活性蛋白A适配体的筛选与鉴定

发布时间：2017-09-12 09:44

本文关键词：肺表面活性蛋白A适配体的筛选与鉴定

【摘要】：利用指数式富集的配基系统进化(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术筛选肺表面活性蛋白A(Pulmonary Surfactant Protein A,SP-A)的寡核苷酸适配体。通过对循环次数、退火温度及引物比例的优化,建立了适合的筛选体系;筛选产物经克隆测序后,用DNAMAN软件初步分析其结构。最终确定以12个循环,55℃为退火温度及80∶1为引物比的反应条件;经过9轮循环筛选,随机ssDNA库与SP-A的结合率从1.3%上升到33%;AP-3和AP-2适配体的随机区含有保守序列TAC-GT,AP-3和AP-1适配体的随机区含有保守序列ACAG,且各适配体的二级结构均以茎-环结构为主。
【作者单位】：天津科技大学生物工程学院教育部工业微生物重点实验室天津市工业微生物重点实验室;
【关键词】： 肺表面活性蛋白A 指数式富集的配基系统进化 寡核苷酸适配子
【基金】：天津市科委项目(No.12ZXCXSY07500) 天津市滨海新区科委项目(No.2012-XJR21047) 科技部项目(No.12C26211600515)资助
【分类号】：R341
【正文快照】： 1引言SP-A是一种多功能糖蛋白,在调节肺表面活性物质(PS)代谢、基因表达、肺内免疫及炎症反应方面具有重要作用[1~5]。SP-A主要在肺泡Ⅱ型上皮细胞中合成,在肺外表达量很少,在肺内则为高浓度表达,表现为肺特异性[6]。SP-A分子量为28~36kDa,等电点为4.65.5。在肺泡中,SP-A一般

【相似文献】

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1 肖燕,崔社怀;肺表面活性蛋白A在免疫炎症反应中的作用[J];免疫学杂志;2000年S1期

2 孟颖,赵举,阮应茆;外源性肺表面活性物质对离体鼠肺缺血再灌注损伤的作用[J];中国医学科学院学报;2004年03期

3 詹林盛,孙红琰,彭剑淳,邵宁生,王全立;丙型肝炎病毒核心蛋白寡核苷酸适配子的筛选与鉴定[J];中华微生物学和免疫学杂志;2002年05期

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5 蔡栩栩,杜悦,高红,李书琴,李岩,孟菲;孕期被动吸烟对新生大鼠肺SP-A和SP-B mRNAs表达影响的研究(英文)[J];中国现代医学杂志;2004年11期

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