脱细胞小牛肌腱组织形态学和生物力学特性研究
本文关键词:脱细胞小牛肌腱组织形态学和生物力学特性研究
【摘要】:目的研究反复冻融结合核酸酶处理小牛肌腱脱细胞效果以及对肌腱组织形态、结构、生化成分和力学特性的影响。方法取新鲜1日龄西门塔尔小牛跟腱48根,随机分为3组(n=16):A组为正常对照组,B组采用液氮冷冻/37℃复温反复冻融5次,C组在反复冻融基础上结合核酸酶处理24 h。每组取2根跟腱用于扫描电镜观察,3根用于、组织学及免疫组织化学染色观察,3根用于DNA残留量检测,8根用于生物力学检测。结果扫描电镜观察示A、B组胶原纤维排列致密有序,形态完整,未见断裂;C组胶原纤维排列松散,几乎无断裂。阿利新蓝、天狼星红染色及免疫组织化学染色示C组糖胺聚糖、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白大部分被保留;HE染色和DAPI染色示A、B组胶原纤维间可见较多完整的细胞核,而C组胶原纤维之间未见完整细胞核,但腱内膜上仍有部分细胞核残留。A、B、C组的DNA残留量分别为(0.24±0.12)、(0.16±0.07)、(0.05±0.02)μg/mg,C组显著低于A、B组(P0.05);A、B组间差异无统计学意义(P0.05)。生物力学检测显示,A、B、C组间拉伸强度、断裂应变、刚度和弹性模量差异均无统计学意义(P0.05)。结论反复冻融结合核酸酶处理小牛肌腱,可有效去除细胞成分,同时基本保留肌腱原始胶原纤维结构、形态、大部分细胞外基质成分和力学特性。
【作者单位】: 四川大学华西医院再生医学研究中心;四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程研究室;
【关键词】: 脱细胞肌腱 形态学 组织学 生物力学 小牛
【基金】:国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2012AA020502) 教育部留学回国人员科研启动基金资助项目(2010609)~~
【分类号】:R329
【正文快照】: 肌腱/韧带断裂或损伤临床常见,常用自体肌腱移植修复,但自体肌腱来源有限且供区存在较多并发症[1],因此学者们不断寻找能替代自体肌腱移植的修复材料。动物实验和临床研究表明,经脱细胞处理的同种异体肌腱免疫原性低,组织相容性好,修复肌腱/韧带缺损后可获得不同程度功能恢复[
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