EB病毒BALF4基因在大肠杆菌中的表达纯化与鉴定

发布时间：2017-09-15 20:23

  本文关键词：EB病毒BALF4基因在大肠杆菌中的表达纯化与鉴定

  更多相关文章： 鼻咽癌 BALF 蛋白表达

【摘要】：目的采用大肠杆菌表达EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)壳抗原BALF4(S)重组蛋白并探讨其在鼻咽癌血清学诊断中的应用。方法以EBV DNA为模版,采用PCR法扩增目的基因片段BALF4(S),与原核表达载体PGEX-5X-1连接,构建PGEX-5X-BALF4(S)工程菌株,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达GST/BALF4(S)重组融合蛋白。表达产物经SDS-PAGE、免疫印迹法鉴定后,纯化目的蛋白作为包被抗原,制备ELISA试剂检测鼻咽癌患者和正常人群BALF4(S)-IgA抗体。结果在大肠杆菌中成功地表达了GST/BALF4(S)重组融合蛋白,相对分子质量为63000,免疫印迹证实目的带有免疫原性,目的蛋白经纯化后作为包被抗原检测鼻咽癌患者和健康对照者的灵敏度和特异度分别为78%和90%。结论本文采用大肠杆菌系统成功表达了GST/BALF4(S)重组融合蛋白,对重组抗原在鼻咽癌血清筛选中的诊断价值进行了初步评估,获得了在鼻咽癌筛选中有一定应用价值的PGEX-5X-BALF4(S)工程菌株。
【作者单位】： 中山大学附属第三医院检验科;中山大学附属第三医院血液内科;
【关键词】： 鼻咽癌 BALF 蛋白表达
【分类号】：R378
【正文快照】： EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)为双链DNA病毒,与单纯疱疹病毒、巨细胞病毒等同属人类疱疹病毒组,被列为可能致癌的人类肿瘤病毒之一。大量研究结果证实,EBV是鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的重要诱发因子,NPC的显著特征是病人血清中的EBV抗体(尤其是IgA亚型)水平普

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 祝元雪;李晓江;;EB病毒Rta蛋白在鼻咽癌早期诊断中的研究进展[J];现代肿瘤医学;2013年12期

2 Massimo De Paschale;Pierangelo Clerici;;Serological diagnosis of Epstein-Barr virus infection: Problems and solutions[J];World Journal of Virology;2012年01期

3 胡波;张新玲;周文营;李林;;EB病毒gp125蛋白的酵母表达及在鼻咽癌检测中的应用[J];中山大学学报(医学科学版);2014年05期

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 秦雷;初治鼻咽癌患者检测血清胸苷激酶-1的临床意义[D];安徽医科大学;2013年

2 严翠娥;鼻咽癌实验室诊断指标的相关性研究[D];北京协和医学院;2014年

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 胡波;陈忠城;王东宁;李林;;EB病毒BALF4基因在大肠杆菌中的表达纯化与鉴定[J];中国卫生检验杂志;2013年09期

2 ;[J];;年期

3 ;[J];;年期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

，

本文编号：858698