尿道致病性大肠杆菌fimA基因的克隆与表达

发布时间：2017-09-16 15:22

  本文关键词：尿道致病性大肠杆菌fimA基因的克隆与表达

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【摘要】：目的对尿道致病性大肠杆菌(UPEC)132编码Ⅰ型菌毛的结构基因fimA进行克隆与表达,建立免疫学检测方法。方法采用PCR方法扩增fimA基因,定向克隆pET32a载体,原核表达获得FimA重组蛋白;免疫小鼠制备FimA多克隆抗体;建立全菌ELISA方法,检测UPEC132的Ⅰ型菌毛表型。结果 PCR扩增fimA全基因,构建重组质粒pET32a-fimA,经转化构建重组菌E.coli BL21(DE3)/pET32a-fimA;经IPTG诱导表达及镍亲和层析纯化获得重组蛋白FimA;制备的FimA多克隆抗体效价≥1∶51 200,Western blot显示其良好的特异性;全菌ELISA获得满意结果。结论成功地克隆UPECⅠ型菌毛的结构基因fimA,制备的多克隆抗体为UPEC的检测和致病性的研究奠定了基础。
【作者单位】： 天津市疾病预防控制中心病原生物检测所;天津医科大学基础医学院;
【关键词】： 尿道致病性大肠杆菌 fimA 克隆 表达 全菌ELISA
【基金】：教育部高等学校博士点基金(20070062010)
【分类号】：R378
【正文快照】： 泌尿道感染(urinary tract infection,UTI)是临床常见病。大肠杆菌是UTI的主要致病菌,引起泌尿道感染的大肠杆菌被称为尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC)。菌毛是UPEC的主要毒力因子之一,主要包括P菌毛(P fimbriae)和Ⅰ型菌毛(typeⅠfimbriae)。菌毛

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1 牛亚梅,王e，

本文编号：863848