重组人BMP-2调节VEGF表达的浓度和时间依赖性研究

发布时间：2017-09-17 13:17

  本文关键词：重组人BMP-2调节VEGF表达的浓度和时间依赖性研究

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【摘要】：目的通过基因水平和蛋白水平研究不同诱导浓度以及不同诱导时间重组人BMP-2(recombinanthuman BMP-2,rhBMP-2)调节人脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)表达VEGF的生物学特点。方法从成人脂肪组织中分离培养ADSCs。取第3代细胞,分别用终浓度为0、50、100、200 ng/mL rhBMP-2诱导,24 h后收集样本;另采用浓度为100 ng/mL rhBMP-2诱导(rhBMP-2诱导组),3、6、12、18、24、36、48 h后收集样本,并设未诱导的相应时间点细胞作为对照组;采用RT-PCR和ELISA检测VEGF mRNA和蛋白表达。结果 RT-PCR及ELISA检测示,不同浓度rhBMP-2诱导下VEGF mRNA相对表达量和蛋白表达均呈浓度依赖性,其中100 ng/mL组表达最高。50、100、200 ng/mL组VEGF mRNA相对表达量均高于0 ng/mL组(P0.05);100 ng/mL组VEGF mRNA相对表达量最高,与其余两组比较差异有统计学意义(P0.05)。100 ng/mL组VEGF蛋白表达量显著高于其余各组,差异均有统计学意义(P0.05)。100 ng/mL rhBMP-2诱导ADSCs后VEGF mRNA及蛋白表达呈时间依赖性。rhBMP-2诱导组诱导3、6 h时VEGF mRNA相对表达量及蛋白表达均低于对照组(P0.05);12 h时VEGF表达较低,两组比较差异无统计学意义(P0.05);18、24 h达高峰,rhBMP-2诱导组显著高于对照组(P0.05);36、48 h两组VEGF表达均明显减少,比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 rhBMP-2调节人ADSCs表达VEGF具有浓度依赖性和时间依赖性。rhBMP-2最适诱导浓度为100 ng/mL,诱导至18～24 h是利用rhBMP-2促进组织工程骨血管化的关键时间段。
【作者单位】： 胜利油田中心医院骨科中心;新疆医科大学第一附属医院VIP外二科;
【关键词】： 重组人BMP- VEGF 脂肪来源干细胞 生物学规律
【基金】：高校博士点基金资助项目(20116517120001) 新疆维吾尔族自治区自然科学基金资助项目(2010211A40) 科技支疆项目基金(201191262)~~
【分类号】：R363
【正文快照】： 血管化是组织工程研究中的重点和难点[1]。目前有多种方法促进组织工程骨的血管化,其中单独使用生长因子或联合干细胞共同作用可能是促进组织工程骨血管化的有效方法[2]。脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)因取材简便、储存丰富,近年来已作为种子细胞应用于组

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本文编号：869601